中国黑杂色大便剂可以希释吗?是用水还是其它希释

中文摘要 单次灌胃杂色曲霉素对尛鼠大脑细胞影响的研究 摘 要 目的:杂色曲霉素(ST)是杂色曲霉、构巢曲霉等真 菌产生的毒性代谢产物也是我国恶性肿瘤高发区居民饮 食中嘚主要污染霉菌毒素之一,对人和动物有明显的致癌 性和致突变性但目前sT的毒性实验多是在体外进行的, 诱癌实验所用的杂色曲霉培养粅也难以排除其它致癌物的 存在机体是一非常复杂的生物学系统,许多致癌物必须 通过机体的代谢才能发挥其致癌作用同时,机体在消除 致癌物的致癌性方面也发挥着重要作用因此,了解在整体 水平上通过饮食途径(经口)给予纯化sT对实验动物的生 物学效应十分必要 本研究室在进行长期诱癌动物实验过程中发现sT处 理组小鼠有神经系统功能障碍表现,但有关ST对脑组织 生物学效应的研究于国内外均未见报道本研究分析了经 口给予ST对小鼠大脑神经元的影响,旨在探讨饮食ST暴 露对小鼠脑组织的生物学效应进而对ST暴露对机体的 危险性做出评估。 方法:进行动物实验制造模型实验分两部分进行。 实验I:将30只BALB/c小鼠随机分为5组对照组和不 同剂量ST处理组,每组6只雌雄各3只。处悝组分别 按ST 溶于0.5ml生理盐水中灌胃对照组用等量生理盐水代替。 灌胃12hr后将小鼠脱颈处死迅速留取视交叉后缘至大脑 中文摘要 脚前缘部汾脑组织,从大脑纵裂处平均分为两部分分别 用10%甲醛缓冲液和70%乙醇固定,待制备石蜡切片进行 常规HE染色与免疫组织化学染色和单细胞悬液进行细胞 凋亡和增殖的FCM检测:实验II:将48只BALB/c小鼠 随机分对照组和sT处理组每组24只,雌雄各半实验 ST溶液0.5ml和等量 组和对照组分别以劑量为3000pg/kg 生理盐水灌胃,方法同前两组动物分别于灌胃后6hr、 12hr、24 hr和4811r各取6只小鼠(雌雄各3只)脱颈处 死,立即取脑待测(同实验I)。石蜡切片制备4張l 张用于常规HE染色进行病理形态学观察分析,其余用于 免疫组织化学染色每例均用免疫组织化学 UltraSensitiveM S-P方法检测c.fos、bcl一2、bax基因的蛋 白表达。單细胞悬液进行细胞DNA染色用于大脑神经元 凋亡与增殖的流式细胞定量检测(FCM)。 结果: 1.病理形态学观察:HE染色光镜观察可见 对照组小鼠夶脑组织未见明显异常,而灌胃小剂量ST (3pg/kg)后12 ST后6hr即可导致小鼠 hr和3000pg/kg 大脑皮质、丘脑、海马区神经元出现一定程度的退行性病 变以海马CA2区最為显著,表现为部分胞核形状不规 则体积缩小,染色加深核膜及核仁结构不清,胞浆嗜 酸性变有些可见空泡变化,且随剂量增加和莋用时间延 长病变神经元逐渐增多。光镜下对病变较明显的海马CA2 区病变神经元进行计数分析结果表明ST处理组发生病理 变化的神经元比唎均高于相应对照组,且随着剂量的增加 和作用时间的延长LL侈,J逐渐增高(n=6,r=O.718,P<0.01. 表1和表2);2.c-Fos蛋白免疫组织化学染色:光镜下观 中文摘磬 察对照组未见c.Fos蛋白染色阳性产物,ST各处理组均 呈阳性表达以海马区最为密集,下丘脑、杏仁核、皮质 hr 部位均有较强表达随剂量增加表达增强;ST处理后6 %,之后隧瞻闯延长甏逐渐减弱:24hr为(3052:t:6.60)%, 48hr为(1950a:3.21)%;3.Bcl.2与Bax蛋白兔疫组织 化学染色:对照组未觅阳性染色產物,ST各处理组阳性产 物表达予海马、皮震、下丘臆等部位海马隧享孛经元Bcl一2 与Bax蛋白阳性表达率均随sT剂量增加(3—300099/kg) 而增加, Bcl.2与Bax眈值也增船;随作用时间延长 (6~48hr)Bcl.2与Bax蛋白阳性表达率均增高,但其比 值呈下降趋势; 4.流式细胞定攫检

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