除了目标DNA重组后于宿主dna异源表达,你还知道哪些蛋白质合成的方法,谈谈各有优

来源：蜘蛛抓取(WebSpider) 时间：2020-03-13 23:30 标签： 宿主dna

caviae)CB101能产生多种分子量不同的几丁质酶根据已知几丁质酶基因的DNA保守序列，利用人工合成的PCR引物和CB101总DNA扩增出一个约2.6kb的片段并克隆到pBluescriptⅡKS载体上。序列分析表明这是目前已克隆的最大的微生物几丁质酶基因之一，命名为Chi1编码865个氨基酸，蛋白质分子量为91.5kDa从N端到C端依次包括N-末端信号肽序列，类PKD(Polycystic kidney disease多囊肾)结构域，催化结构域C端类REJ(Receptor for Egg Jelly,卵胶膜受体)区域和两个几丁结合区，是目前已知的最大的微生物几丁质酶中的一个该酶降解胶体几丁质成几丁二糖、三糖和N-乙酰葡萄糖胺，具有几丁质外切和内切双重功能其N端563个氨基酸序列(Chi 1~-，包括信号肽、PKD结构域和催化区)与粘质沙雷氏菌[Serratia marcescens]Chi A高度相似(74.29％)经同源建模，构建了Chi 1部分空间结构模型进而对Chi 1和Chi 1~-做了体外表达、纯化及功能的比较分析，首次揭示了几丁质酶潜在的几丁结合区对酶作用底物与产物的特异性影响即Chi 1~-仍具有较强活性，但其胶体几丁质降解产物为几丁二、三、四糖进一步的实验也证实全酶的最低分孓量底物为几丁三糖，而去除C端的酶片段的最低分子量底物为几丁四糖

【学位授予单位】：厦门大学
【学位授予年份】：2002


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