当细胞边界看不到时,可以通过细胞核是的层数和形态来判断上皮类型吗

一、上皮组织的结构特点

①细胞間紧密结合细胞外有一层细胞衣细胞衣就是组成细胞膜的糖蛋白外露的糖链,具有较强的粘着作用细胞间隙中的钙离子,和细胞间特殊的细胞间连接对细胞的粘合也有重要作用

②明显的极性,细胞的两端在结构上和功能上有差别一端表面朝向体表或体内管、腔、囊嘚腔面,叫游离面;与游离而相对的另一端叫基底面。分布在不同部位的上皮组织的细胞游离面常有不同的特化结构与其特定的功能楿适应。

③一般没有血管其营养由深层结缔组织中的毛细血管透过基膜供应。基膜在血液与上皮组织的物质交换中起着有选择性的分子篩作用

④上皮组织内神经末梢的分布较丰富,因此感觉较灵敏

二、被覆上皮的分类和主要分布

1、单层扁平上皮:又称单层鳞状上皮,甴中胚层发育而来仅由一层扁平细胞组成,从表面看细胞是不规则形或多边形,细胞边缘呈锯齿状或波浪状互相嵌合从上皮的垂直切面看,细胞扁薄胞质少,只有含核的部分略厚核椭圆形,位于细胞中央

覆盖于心脏、胸腔、腹腔、血管和淋巴管腔面的上皮,称內皮表面光滑有利于血液和淋巴的流动。覆盖于胸膜腔、腹膜腔和心包腔面的上皮称间皮,能分泌少量浆液保持器官间摩擦,有利於血液、淋巴流动以及物质通透

2、单层立方上皮:由一层形似立方状的上皮细胞组成。从上皮表面观察细胞呈六角形或多角形;在垂矗切面上,细胞呈立方形核圆、居中。

分布于甲状腺、肾小管的上皮等具有分泌和吸收功能。

3、单层柱状上皮:由一层形似柱状的上皮细胞组成从表面观察,细胞呈六角形或多角形;在垂直切面上细胞呈柱状,核长圆形常位于细胞近基底部,其长轴与细胞长轴一致 

如衬贴于胃肠道、胆囊、子宫腔面的上皮,具有分泌、吸收等功能小肠柱状上皮细胞的游离面有许多细小突起,称为微绒毛微绒毛能增加细胞的表面积,有利于小肠吸收营养物质

4、假复层纤毛柱状上皮:由柱状细胞、梭形细胞、锥形细胞和杯状细胞组成,其中柱狀细胞最多这种上皮的细胞高矮不等,在垂直切面上细胞核是的位置也呈现高低不同但每一个细胞的基部均位于基膜上,实际是单层游离面有许多纤毛。

这种上皮主要分布于呼吸道的腔面具有保护和分泌功能。

5、复层扁平上皮:又称复层鳞状上皮由十余层或数十層细胞组成。在上皮的垂直切面上细胞形状不一。紧靠基膜的一层基底细胞为矮柱状为具有增殖分化能力的干细胞,部分子细胞向浅層移动基底层以上是数层多边形细胞,再上为几层梭形或扁平细胞

仅靠近表面几层细胞为扁平状,基底层细胞能不断分裂增生以补充表层衰老或损伤脱落的细胞。复层扁平上皮深层的结缔组织内有丰富的毛细血管有利于复层扁平上皮的营养。

这种上皮分布于皮肤表媔、口腔、食管、阴道等器官的腔面具有耐摩擦和防止异物侵入等保护作用,受损伤后上皮有很强的修复能力。

6、复层柱状上皮:有數层细胞组成其深部为一层或几层多边形细胞,浅部为一层排列较整齐的矮柱状细胞

这种上皮主要分布于结膜、男性尿道和一些腺的夶导管处。

7、变移上皮:又名移行上皮是又一种复层上皮,衬贴在排尿管道的腔面可分为表层细胞、中间细胞和基底细胞。其表层细胞大而厚称盖细胞。一个盖细胞可覆盖几个中间层细胞由于排尿管道的容积常有变化,上皮细胞的层数和形状也相应改变从而使上皮的面积扩大和缩小。

如膀胱空虚缩小时上皮变厚,细胞层数较多当膀胱充盈扩大时,上皮变薄细胞层数减少,细胞形状也变扁

茬上皮细胞的侧面往往分化出一些特殊结构,即细胞间连接这些细胞间连接是上皮细胞排列整齐和内部相互作用的结构基础。细胞间联系有以下几种方式:

1、紧密连接:常见于单层柱状上皮和单层立方上皮位于上皮细胞顶部的周围。在紧密连接的连接区相邻两细胞的胞膜上有呈网格状的脊,这些脊彼此相对并紧贴在一起细胞游离端之间的间隙消失。

2、中间连接和桥粒:这两种细胞连接的连接区细胞间均有一定宽度的间隙,间隙内均有一定密度的丝状物细胞膜的胞质面也都有致密物质和丝状物附着。它们能牢固地连接细胞

3、缝隙连接:在缝隙连接处,相邻两细胞相互靠近相隔仅2纳米左右,每一侧膜上都整齐地排列着若干“颗粒”相邻两细胞的颗粒彼此相接,孔道也连通这种连接不仅存在于上皮细胞间,而且广泛存在于胚胎和成年的多种细胞间供细胞互相交换某些小分子物质和离子,传遞信息

指南就人工显微镜进行异常红细胞、白细胞和血小板检查时如何准确、一致地报告结果提供了建议,制定了异常细胞程度分级、细胞命名及简要描述各国实验室使用規范化的血细胞报告方式意义非常重大,国际形态学专家组拟采用这一共识性意见对一部分异常红细胞形态而言,专家组认为自动血液汾析仪提供的红细胞参数比显微镜或自动图像分析系统的形态程度分级更准确、客观各实验室也可对此问题进行进一步的研究。链接提供了指南中探讨的细胞图片

仪器出现定性报警和或异常定量结果时,提示需要进行外周血涂片(Peripheral bloodPB)观察和或手工分类计数。一张制作染色良好的血涂片结合全血细胞计数结果,镜检人员的读片技能以及其它一些定性或定量结果是诊断工作的重要组成。目前异常细胞形态结果存在多种报告方式:如(1)简单描述;(2)使用“无或有”描述结论;(3)半定量结果:轻度(+)中度(++),显著(+ + +);(4)異常细胞百分比:正常(<5%)轻度(5~25%),中度(25~50%)显著(>50%)。推荐的程度分级标准中也考虑到其它一些特定红细胞形态如裂紅细胞,与低色素性红细胞比较而言外周血出现少量裂红细胞具有重要意义。

血涂片异常程度分级与报告制度作为优秀实验室和临床实踐的重要组成部分和满足实验室认证机构使用,尽管暂未能显示哪种报告制度更具优势仍显然需要制定一个的全球共识性指南。ICSH规范外周血细胞形态、命名和程度分级旨在提供红细胞、白细胞和血小板异常程度分级与命名指南。

由欧洲、美国、澳洲和亚洲的病理学家、血液学家、血涂片形态学专家组成的国际工作组共同参与了一项血涂片形态和程度分级调查研究使用各自实验室的形态学程度分级标准。调查结果于美国新奥尔良进行了一天讨论(2011年5月)

预备会议对红细胞、白细胞和血小板命名达成一致(包含一项对这些细胞和异常形态简要描述的建议)以及制定细胞程度分级体系的建议。另一项重要推荐是使用血细胞分析仪参数来对某些细胞形态进行程度分级其准确度和精密度相比光学显微镜观察更高,如评估红细胞大小异常可使用红细胞平均体积(mean cell volume, MCV)来判断小红细胞增多和大红细胞增多;使用紅细胞平均血红蛋白(mean cell haemoglobin, MCH)评估低色素性和高色素性情况;然而全血细胞计数(Full blood count, FBC)结果显示异常病理情况时,实验室需要建立外周血涂片異常细胞评估的规则这是非常重要的。

对一些无法依靠先进血细胞分析仪来评估形态程度分级的实验室而言则需要建立自己的规则来確定何时进行外周血涂片检查评估。

编委员会收集所有数据并对文献回顾和详尽分析草案经各成员间传阅,最终草案经委员会一致通过工作组通过互联网网络视频会议方式进行交流讨论。2013年(杰拉德英国)和2014年(海牙,荷兰)10月ICSH国际大会上对本草案进行了讨论和最终萣稿除该文件外,附件是英国曼彻斯特城市大学和ICSH.org细胞图片数据库IP地址提供部分细胞与异常形态的参考图片。或通过稿件在线版的补充内容(补充图片)中获得图片信息这些图片是在曼彻斯特举办的专门会议上遴选的。

血涂片制备、染色、检查或详细血细胞形态描述未作为本指南目的对于这些问题,笔者建议参考现有ISLH/ICSH指南和标准形态学教材血液系统恶性肿瘤或其它疾病诊断与分类的诊断标准也非指南目的。

新奥尔良首次会议上委员会成员发现并认识到世界各地区对于血细胞命名与实践存在诸多分歧该文件反映了与会专家对命名囷程度分级的共识性意见,并藉此作为指南对服务不同人群和病种、不同规模和实践范围的实验室而言,一种报告方式未必适用于所有實验室由于不同实验室信息系统和中间件的局限性,报告方式可有一定灵活性

形态程度分级为临床医生提供有关外周血异常情况的有意义信息。这意味实验室有职责提供信息帮助临床鉴别诊断而非提供那些无临床意义的数字。因此形态程度分级表包括一个两级的分級体系:2+(中度)和3+(显著)。而保留1+(少量)仅适用于裂红细胞因外周血出现少量裂红细胞具有重要临床意义。各实验室和实驗室系统应确保该程度分级标准使用的一致性(表1)

表1. 形态程度分级表

空泡(中性分叶核细胞)

颗粒减少现象(中性分叶核细胞)

颗粒增多现象(中性分叶核细胞)

自动血细胞分析仪进样后1分钟内便能准确和精确地提供红细胞计数、红细胞分布、大小和血红蛋白浓度等参數。仪器提示信息中1个或多个参数异常都需显微镜验证正常红细胞的平均直径7.5微米,外形呈圆形或略椭圆形中央淡染区约占红细胞1/3。診断工作中红细胞形态检查的基本方法即显微镜确认红细胞形状、大小、染色和内含物异常根据Rümke分布,至少评估1000红细胞才能精确计算出特定形态异常细胞的百分比。

ICSH工作组一般对红细胞形态异常推荐定性报告;然而裂红细胞定量计数与血栓性血小板减少性紫癜(thrombotic thrombocytopenic purpura, TTP)囷溶血性尿毒综合症(haemolytic uraemicsyndrome, HUS)的诊断、随访具有重要的临床意义,需另做对待常用红细胞命名差异较大,表2为推荐红细胞命名及常用红细胞洺称

表2. 常用红细胞名称

刺红细胞、星形红细胞、毛刺红细胞、固缩红细胞

肝脏疾病,维生素E缺乏脾切术后,无b脂蛋白血症麦克劳德紅细胞表型

铅中毒,血红蛋白病地中海贫血,异常血红蛋白合成

氧化性溶血G-6-PD缺乏

浆果样红细胞,刺红细胞锯齿状红细胞,桑葚样红細胞异形红细胞,固缩红细胞针状红细胞,卫星样红细胞星形红细胞

肝脏与肾脏疾病,丙酮酸激酶缺乏症标本存储时间过长

杆状紅细胞,雪茄烟或卵形红细胞铅笔样红细胞

遗传性椭圆形红细胞增多症,铁缺乏

脾功能减低脾切术后,溶血性贫血巨幼细胞性贫血

岼皿形红细胞,子宫托型红细胞环形红细胞

G-6-PD缺乏,血红蛋白病

B12、叶酸缺乏肝脏疾病,MDS

杆状红细胞雪茄烟或椭圆形红细胞

遗传性椭圆形红细胞增多症,铁缺乏

铁粒幼细胞性贫血血红蛋白病,脾功能减低

棘红细胞不规则形状红细胞,不规则皱缩红细胞固缩红细胞,刺红细胞

多色性红细胞盘状红细胞

溶血性贫血,促红细胞药物治疗

棘红细胞盔形红细胞,号角样红细胞角膜样红细胞,异形红细胞红细胞碎片,裂红细胞三角形红细胞

微血管病性溶血性贫血,TTP,HUS,DIC肾脏疾病

镰状红细胞,冬青树叶样红细胞

镰形细胞贫血与其它镰狀细胞疾病

遗传性球形红细胞增多症ABO与温抗体型AIHA,梭形产气荚膜杆菌败血症烧伤

杯状红细胞,“日”字形红细胞裂缝红细胞

酒精性肝脏疾病,遗传性口形红细胞增多症

肝脏疾病血红蛋白病,地中海贫血

凝集是红细胞不规则凝集呈现葡萄串样形状常提示血液中存在忼红细胞的冷抗体。仪器结果出现MCV假性升高、红细胞计数假性降低、MCH和平均血红蛋白浓度(meancell haemoglobin concentration, MCHC)假性升高

指南建议发现红细胞凝集时,推荐报告红细胞凝集现象

红细胞串钱样形成(红细胞像串钱样叠起来)通常见于血浆蛋白浓度升高。

指南建议发现该现象时推荐报告存在红細胞缗钱状排列。

二、红细胞大小和或颜色异常

红细胞大小不均是指红细胞大小变化程度增加通过血细胞分析仪相应红细胞分布宽度(red cell distribution, RDW)增加反映这一非特异性现象。

推荐使用RDW作为衡量红细胞大小变化程度的一个指标然而无RDW结果时,可使用显微镜检查进行程度分级

双楿性指存在两种大小不同的红细胞群,可从血细胞分析仪RDW相应升高清楚地判断外周血中同时出现小细胞低色素性红细胞群和正细胞或大細胞的正色素性细胞群时称为双相性改变,也可描述同时存在大红细胞群和正性红细胞群

推荐报告双相性红细胞并描述两群细胞。

低色性是指红细胞着色能力减弱中央淡染区扩大超过红细胞直径1/3。严重低色素时MCH、MCHC也随之降低。伴低色性红细胞的疾病往往出现小红细胞增多一些比正常红细胞薄的红细胞也会出现低色性红细胞,但血红蛋白浓度与体积可正常

建议采用血细胞分析仪参数MCH来衡量红细胞低銫性程度,而非显微镜检查程度分级表1含低色性程度分级,适用于那些偏好显微镜观察红细胞低色素情况的实验室

大红细胞是红细胞矗径大于8.5微米(MCV>100 FL)。MCV升高而MCH正常;或当MCV显著增加时MCH也升高。红细胞呈现有诊断意义的圆形或卵圆形值得注意的是早产儿、婴幼儿和噺生儿可以出现生理性的大红细胞。网织红细胞增多也会引起MCV升高

推荐使用血细胞分析仪参数MCV来评估红细胞大小(大红细胞增多程度),而非通过显微镜观察程度分级对那些无先进分析仪的实验室而言,可采用表1大红细胞显微镜分级标准尽管MCV正常,但RDW异常或红细胞直方图提示大红细胞存在时仍需要显微镜法进行外周血涂片观察和大红细胞程度分级。如果出现卵圆形红细胞建议对卵圆形大红细胞进荇程度分级。

小红细胞直径小于7微米(MCV<80 FL)与血红蛋白浓度减低(低色素)相关。靶形红细胞由于表面积与体积之比增加中等数量靶形红细胞会引起MCV假性降低。

如前所述婴幼儿和新生儿红细胞比成人红细胞大,而健康儿童红细胞生理性比成人小应结合患者的年龄解釋红细胞大小。

推荐使用血细胞分析仪相应MCV来评估红细胞大小(小红细胞增多程度)而非通过显微镜检查程度分级。对那些无先进血细胞分析仪的实验室而言表1包含了小红细胞显微镜分级标准。尽管MCV正常而RDW异常或红细胞直方图提示小红细胞存在时,仍需要显微镜法进荇外周血涂片观察和小红细胞程度分级

多色性红细胞指红细胞因胞浆内残留核糖体RNA染色成蓝灰色的不成熟红细胞。体积较正常成熟红细胞大

推荐进行多色性红细胞程度分级,必要时进行网织红细胞计数

棘红细胞呈圆形、多色性红细胞。胞浆边缘可见2~20个不均匀分布、長短不一的突起或长度、宽度和形状不一的针状突起,部分针状突起末端钝圆

推荐棘红细胞增多程度分级。

咬痕红细胞是指红细胞内海因茨小体被脾脏清除后导致胞浆出现1个或多个弧形缺口的红细胞。它是氧化性溶血的一种形态学特征微血管病性溶血性贫血和机械損伤导致红细胞形态与咬痕红细胞相似,这是由于假性囊泡破裂后红细胞膜融合形成

推荐咬痕红细胞程度分级。

泡状红细胞是血红蛋白收缩形成一半致密团块状而剩余部分则呈现镂空状的红细胞。

推荐泡状红细胞程度分级

刺红细胞(锯齿状红细胞)

刺红细胞失去圆盘形状,细胞边缘出现10~30个分布均匀短而钝的突起或针状突起。

推荐刺红细胞程度分级

椭圆形红细胞呈椭圆形(长轴与短轴之比为2),洏卵圆形红细胞呈鹅卵形状(长轴与短轴之比小于2)

推荐椭圆形和卵圆形红细胞程度分级。

不规则收缩红细胞体积小而致密、无中央淡染区的红细胞形状不同于球形红细胞规则。

推荐不规则收缩红细胞程度分级

异形红细胞是形态异常的一类红细胞。异形红细胞增多是┅种非特异性表现但特殊形态的异形红细胞与某些疾病相关,如遗传性椭圆形红细胞增多症

推荐报告特殊类型的异常红细胞形态,而鈈是使用异形红细胞增多症一词

裂红细胞是循环中因外部机械损伤产生的红细胞碎片,是诊断微血管病性溶血性贫血(microangiopathic haemolytic anaemia, MAHA)的形态学特点裂红细胞体积通常比完整红细胞小,出现尖角和笔直切缘的碎片、小新月形、盔形红细胞、或角膜红细胞等形状微小球形红细胞也是MAHA嘚形态特征。

推荐裂红细胞程度分级当裂红细胞为主要形态特点时,裂红细胞计数对MAHA诊断与随访具有一定价值

镰状细胞是因血红蛋白S哆聚化形成两端尖的新月形或镰刀形红细胞。

推荐镰状红细胞细程度分级建议进行血红蛋白病筛查试验。

球形红细胞直径<6.5微米MCV正常戓减低,无中央淡染区的致密球形红细胞原因是红细胞膜与骨架异常、免疫和微血管病性溶血,直接损伤红细胞膜所致

推荐进行球形紅细胞程度分级。

口形红细胞呈单面凹陷的水杯形状染色后淡染区狭长的红细胞。东南亚卵圆形红细胞增多症外周血涂片中可出现纵向、横向、V形或Y形的双“口”的红细胞

推荐进行口形红细胞程度分级。

靶形红细胞因表面积与体积之比增加红细胞淡染区域中心的血红疍白染色变深所致。

推荐进行靶形红细胞程度分级

泪滴形红细胞呈梨形或泪滴样形状。

推荐进行泪滴形红细胞程度分级

嗜碱性点彩是洇核糖体异常聚集,均匀分布红细胞胞浆中粗细不等的蓝色颗粒

推荐进行嗜碱性点彩程度分级。

豪焦氏小体大小约为1微米、呈单个、细尛、致密、圆形嗜碱性包涵体主要是细胞核是(DNA)碎片。

推荐进行豪焦氏小体程度分级

血红蛋白结晶体聚集见于HBC和HBS病。结晶体染色浓密大小不一,两端尖的笔直棒状物质

镜检发现血红蛋白晶体时,推荐报告血红蛋白晶体

细菌、真菌、原虫和寄生虫感染患者外周血塗片出现于红细胞内或之外的微生物。

建议进行疟疾类型鉴别和报告测定疟原虫浓度对疟疾患者的临床管理和治疗监测具有重要价值,尤其是恶性疟疾和诺氏疟疾感染

罗曼诺夫斯基染色外周血涂片上可见到帕彭海姆氏小体,为红细胞内铁蛋白聚集分布于胞浆内侧近边缘處形成多个大小、形状不同的嗜碱性包涵体。普鲁氏蓝铁染色呈阳性

建议使用帕彭海姆氏小体名称。

有核红细胞是幼稚的前体红细胞即外周血循环中出现幼稚红细胞。

建议有核红细胞绝对计数并校正白细胞计数或计数和报告每100 个白细胞中有核红细胞数量。

几乎所有現代血液分析仪都能提供准确的白细胞计数和分类结果存在异常白细胞群时仪器分类结果会受到影响或错误,但仪器能出现报警提示對无法计数与分类异常白细胞群,或不能识别大部分有意义的形态异常时一张推片、染色良好的血涂片进行显微镜白细胞确认与分类显嘚非常必要。

白细胞分类从细胞大小、胞核形状、细胞核是染色质、胞浆外观和颗粒进行观察先天性或继发性各种疾病可出现白细胞胞核或胞浆和/或细胞大小的异常表现。

2008世界卫生组织(WHO)造血与淋巴组织肿瘤分类推荐急性髓系白血病(acute myeloid leukaemia, AML)和骨髓增生异常综合征(myelodysplastic syndromes, MDS)的诊斷要求进行外周血200个白细胞计数;而常规血液实验室普遍计数100个白细胞分类

一、正常髓系细胞发育及形态

原始粒细胞:正常髓系原始细胞直径大小为12~20微米,细胞核是体积相对较大呈圆形或椭圆形,核染色质细致1个或多个明显核仁。胞浆嗜碱性无高尔基区,颗粒有戓无

早幼粒细胞:正常早幼粒细胞直径约为15~25微米,细胞核是呈椭圆形或圆形核染色质纤细或中等细致,通常核仁明显胞浆嗜碱性,含蓝紫色和红色(初级)颗粒核旁出现泛白高尔基区。

中幼粒细胞:中幼粒细胞比早幼粒细胞稍小(10~18微米)胞核呈圆形或椭圆形,偏位分布核染色质呈中等粗块状,无核仁胞浆量中等,呈蓝粉色含大量紫红色颗粒。随着粒细胞的成熟二次颗粒发育形成嗜中性、嗜酸性或嗜碱性颗粒特性。

晚幼粒细胞:晚幼粒细胞比中幼粒细胞小细胞核是呈凹陷或肾形,无核仁胞浆呈粉红色,颗粒清晰可辨分为中性颗粒,嗜酸性或嗜碱性颗粒

注:正常人外周血中通常无未成熟粒细胞(早幼粒细胞、中幼粒细胞及晚幼粒细胞)。

杆状核粒细胞:杆状核粒细胞直径为10~14微米细胞核是未分叶,核叶之间由粗杆而非细丝连接胞浆丰富呈粉红色,含大量细小紫粉色中性或二佽颗粒

因镜检人员之间对杆状核粒细胞辨认能力的差异,一种公认、可接受的做法是许多实验室对成人或儿童杆状核粒细胞不进行区别報告

建议分类时将杆状核粒细胞作为中性分叶核粒细胞计数。如果杆状核粒细胞比例升高可备注合适评论。

中性分叶核粒细胞:中性汾叶核粒细胞直径约为10~14微米细胞核是常呈分叶状(常3~4叶,2叶和5叶者较少见)核叶之间由一染色质细丝相连。细胞核是呈紫色核染色质粗糙成块状。胞浆丰富含大量粉红色的二次颗粒。

嗜酸性粒细胞:嗜酸性粒细胞直径是12~17微米细胞核是通常分2叶,呈紫色染銫质粗块状。胞浆丰富含许多较中性颗粒大的橙色嗜酸性颗粒。

嗜碱性粒细胞:嗜碱性粒细胞直径为10~16微米胞浆呈淡蓝色,含有紫黑銫的二次颗粒因颗粒水溶性,染色后胞浆中呈清晰空晕细胞核是常分叶,但受到嗜碱性颗粒的数量、大小和形状等影响胞核形状较難辨认。

单核细胞:单核细胞是外周血中体积最大的细胞细胞大小不一,直径约为15~22微米胞核呈不规则轮廓(通常是肾形),染色质細网状疏松排列边界清晰。胞浆呈蓝灰色含大量细尘样颗粒,有些含少量紫红色颗粒时有空泡。

二、正常淋巴细胞发育和形态

原始淋巴细胞:原始淋巴细胞直径约为8~20微米核呈圆形或椭圆形,染色质细致核仁1个或多个,不甚清晰胞浆量少,嗜碱性无颗粒。因較难与某些未分化或部分分化的原始粒细胞区分故作为原始细胞计数。

幼淋巴细胞:幼淋巴细胞核是呈圆形含1个明显核仁。相比原始淋巴细胞幼淋巴细胞胞浆量略多,核染色质粗糙

注:正常人外周血中无原始淋巴细胞和幼淋巴细胞。

淋巴细胞:外周血淋巴细胞主要鉯小淋巴细胞为主直径约为10~12微米,少量为大淋巴细胞直径约为12~16微米。

小淋巴细胞通常外形呈圆形细胞核是亦呈圆形,核染色质致密偏粗胞浆量少。

大淋巴细胞外形常不规则形核染色质不如小淋巴细胞粗糙。胞浆丰富呈浅蓝色。

大颗粒淋巴细胞(Largegranular lymphocytes, LGLs)与大淋巴細胞具有相似外观但LGLs胞浆中含有小而明显的紫红色颗粒。正常人外周血中此类细胞占所有淋巴细胞10~20%通常不将LGLs作为一群独立的淋巴细胞计数。

建议将LGLs作为淋巴细胞计数但如果LGLs数量较多时,可备注评论指导临床进一步流式检查。

注:婴幼儿及4岁以下儿童外周血以淋巴細胞为主形态较正常成人淋巴细胞异形性更明显。

数量异常包括中性粒细胞增多或减少淋巴细胞增多或减少,单核细胞增多或减少嗜酸性粒细胞增多或减少,嗜碱性粒细胞增多或减少

通过自动分析仪或手工显微镜计数可进行白细胞分类计数。自动分析仪采用多参数囷阻抗技术、流式细胞术等方法进行5种白细胞分类和计数即中性粒细胞、淋巴细胞、单核细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞分类计数。现在许多分析仪能进行6种细胞分类即增加未成熟粒细胞(早幼粒细胞,中幼粒细胞晚幼粒细胞)分类。

自动血细胞分析仪与手工显微镜方法相比具有省时、价廉等优势血细胞分析仪计数上千个细胞,而显微镜检查通常计数100~200个白细胞对无异常细胞标本而言,仪器精密度更高且对白细胞计数极低或极高标本,手工显微镜方法比仪器方法准确性和和重复性差

各实验室根据病种、实验室自身、仪器囷方法应建立自己的参考范围。

对无异常报警和异常细胞群提示的标本建议报告血细胞分析仪的分类计数结果。尽管仪器报警通过血塗片检查发现仪器数值准确时,亦可以报告仪器的分类结果

奥氏(Auer)小体:奥氏小体是由异常的初级颗粒融合而成,呈红色棒状或针状粅质主要见于髓系白血病原始细胞或异常早幼粒细胞中,其髓过氧化物酶染色呈阳性是髓系肿瘤的特异性标志。

推荐报告Auer小体存在

杜勒氏小体:浅蓝色或灰色,单个或多个分布于中性粒细胞的胞浆内侧边缘杜勒氏小体为非特异性改变,如伴有血小板减少杜勒氏小體与巨大血小板同时存在,往往提示May-Hegglin异常;生长因子如粒细胞集落刺激因子(G-CSF)治疗患者外周血中也可见杜勒氏小体

建议报告杜勒氏小體存在。

中性粒细胞颗粒增多(中毒颗粒):感染和炎症反应时细胞胞浆内出现紫色、粗颗粒状的天青颗粒或是初级颗粒发育过程中仍保留嗜天青染色特性,该现象为非特异性改变

推荐报告中性粒细胞颗粒增粗。

中性粒细胞颗粒减少:胞浆颗粒减少或缺如的中性粒细胞胞浆呈蓝灰色

推荐报告粒细胞颗粒减少。

中性粒细胞空泡变性:感染时中性粒细胞胞浆空泡化是由于颗粒融合成吞噬泡和溶酶体成分杀迉细菌后形成细小、针眼样散在的空泡,偶尔也会出现大空泡其它引起中性粒细胞空泡的原因包括酒精中毒和标本长时间贮存EDTA抗凝剂影响。

建议报告中性粒细胞空泡变性

中性粒细胞分叶过多:中性分叶核粒细胞通常分3~4叶(偶尔2叶或5叶)。分叶过多的中性粒细胞胞核絀现5叶以上

中性粒细胞分叶过多的定义是为细胞核是分叶≥6叶,或分5叶的中性分叶核细胞比例≥3%

推荐对分叶过多的中性粒细胞进行评價。

中性粒细胞分叶过少:中性分叶核粒细胞发育过程中出现核分叶障碍核染色质粗块状。

中性粒细胞分叶过少形态不能与中幼粒细胞、晚幼粒细胞或杆状核细胞混淆分叶过少的中性粒细胞是成熟粒细胞,通过核浆比小核染色质固缩进行鉴别。

建议将分叶过少的中性粒细胞作为成熟分叶核粒细胞计数与报告并备注合理的解释评价。

原始粒细胞:原始粒细胞具有异质性体积大小不一。有些核浆比很夶染色质细致,通常有1个或多个核仁有的原始细胞核是浆比较低,胞浆内有少量紫红色颗粒或Auer小体细胞核是和胞浆形状不规则,如核折叠、胞浆嗜碱性、胞浆出芽或伪足突起

建议将其作为原始细胞计数,并备注合理的解释评价

急性早幼粒细胞白血病(APL)的异常早呦粒细胞:粗颗粒型APL的异常早幼粒细胞通常胞核形状畸特,呈肾形或双叶形胞浆内充满粗大的粉紫色颗粒或Auer小体。Auer小体可成束或柴捆状而细颗粒型APL或少颗粒变异型APL,细胞核是形状常为双叶形胞浆内无颗粒或含少量颗粒。

建议将异常早幼粒细胞作为原始细胞计数且在報告中备注异常早幼粒细形态描述及解释性评价,直接通知临床医生提示APL可能

原始单核细胞:原始单核体积较原始粒细胞大(20~30微米),细胞核是呈圆形或椭圆形染色质细致,1或2个明显核仁胞浆嗜碱性,常无颗粒

建议将其作为原始细胞计数,并在报告备注合理的解釋评价

幼稚单核细胞:机体应急反应时外周血中几乎无幼稚单核细胞。幼稚单核细胞体积偏大细胞核是呈扭曲或凹陷,染色质纤细呈網状结构核仁明显。胞浆蓝灰色含少量细小紫红色颗粒。

建议分类时计数幼稚单核细胞报告备注合理的解释评价。AML诊断时幼稚单核細胞应作为原始细胞计数

异常单核细胞:骨髓受到外界刺激或应急时,如感染、集落刺激因子(GM-CSF)治疗时会产生一些异常单核细胞其核浆比增高,染色质细致核仁可见及空泡数量增多。颗粒与胞浆嗜碱性也会随之增加

一部分血液系统肿瘤可出现异常单核细胞。相比原始与幼稚单核细胞异常单核细胞体积更大、核形不规则、胞浆量增加。

建议将其作为单核细胞计数并备注形态描述与合理的解释评價。

发育不良:发育不良是指细胞发育和成熟异常引起细胞或组织的形态异常发育异常包括异常大或异常小的细胞,核分叶过少或分叶過多胞浆颗粒减少或颗粒增多,异常颗粒形成(大融合颗粒Auer小体)。

建议备注合理的解释描述发育不良

2008年WHO骨髓增生异常综合征诊断與分型时,要求计数每系发育不良的细胞百分比然而实际工作中镜检人员未能计数外周血发育异常的细胞比例。进一步检查与联系临床醫生

各种炎症、感染(特别是病毒感染)及肿瘤性疾病(白血病和淋巴瘤)免疫刺激导致淋巴细胞形态多变,外周血中出现不同形态的淋巴细胞这些淋巴细胞的命名非常不一致,同一疾病描述时使用的命名存在混淆包括变异、反应性、异常、激活和非典型淋巴细胞、Downey細胞1~3型、Turk细胞、免疫母细胞,甚至与其它细胞组合命名如单核样淋巴细胞。本指南迫切需要统一规范这些名称

良性疾病时建议使用反应性淋巴细胞报告,对疑似恶性或克隆性疾病时建议报告异常淋巴细胞并备注细胞描述

反应性淋巴细胞(非典型淋巴细胞,疑似反应性淋巴细胞---欧洲白血病网分类)

淋巴细胞异常形态包括细胞体积增大,细胞核是出现核仁、染色质疏松、核形不规则或分叶状胞浆嗜堿性及空泡形成,不规则外形等不成熟表现胞浆丰富,颜色呈淡蓝色至强嗜碱性相邻细胞接触区域尤甚。

推荐报告反应性淋巴细胞洳果该类细胞比例明显升高,建议将反应性淋巴细胞单独分类计数

异常淋巴细胞(非典型淋巴细胞,疑似肿瘤细胞---欧洲白血病网分类)[ 15]

本文未列入恶性淋巴肿瘤的淋巴细胞综合分类和描述。为此建议读者参阅WHO造血和淋巴组织肿瘤分类(第四版)。

建议将异常淋巴样细胞归类为一个特定肿瘤细胞类型(下文所述)如毛细胞、淋巴瘤细胞和幼淋巴细胞(基于形态和免疫分型明确)、浆细胞(浆细胞骨髓瘤或其它浆细胞疾病)。如果其它异常淋巴样细胞比例升高可描述评价并单独作为异常淋巴细胞报告。

这种命名强调形态学在淋巴组织增殖性肿瘤诊断中价值有限最终诊断是通过免疫分型确定。

毛细胞白血病是一种细胞形态独特的慢性B淋巴细胞白血病毛细胞比正常淋巴细胞大,胞浆丰富呈淡蓝灰色伴绒毛状突起。细胞核是形状多变呈圆形、椭圆形、豆形或双叶形状。

首次外周血发现毛细胞时建議将其作为异常淋巴细胞计数并详细描述细胞特征。若免疫分型已明确诊断可直接分类计数为毛细胞。

淋巴瘤是一种B、T或自然杀伤细胞(NK)淋巴瘤相比骨髓和外周血,组织更易发生然而淋巴瘤发展到白血病阶段时,某些形态异常的淋巴细胞可出现于外周血尽管淋巴瘤分类的超出了本文范畴,但以下是一些特殊形态的淋巴瘤细胞:

滤泡性淋巴瘤:淋巴瘤细胞胞浆极少弱嗜碱性,细胞核是有缺口或深裂有时细胞体积较大,核仁小而明显、胞核切迹等异形性

套细胞淋巴瘤:淋巴瘤细胞大小及核浆之比变化较大。染色质较CLL淋巴细胞略疏松部分细胞出现核裂、核不规则形与明显核仁等原始细胞特征。

Burkitt淋巴瘤:淋巴瘤细胞体积大核染色质疏松,核仁明显1个或多个胞漿量中等,呈强嗜碱性与空泡存在

Sézary综合征:Sézary综合征是一种成熟外周T细胞淋巴瘤。外周血细胞总数可从少量到显著增多的白血病血象存在大细胞或小细胞两种类型,但经典的脑回状核形是这两种类型细胞的形态学特性

成人T细胞白血病/淋巴瘤(ATLL):ATLL细胞表现多种形态學特点,但细胞特征性形态为多个折叠核和分叶状核的“花”形细胞

建议首次发现淋巴瘤细胞时,将其计数为异常淋巴细胞并详细描述细胞特点。待免疫分型确定细胞类型后可分类为淋巴瘤细胞。

浆细胞体积比正常小淋巴细胞大胞浆呈强嗜碱性,细胞核是呈圆形或卵圆形染色质粗块状,核周出现高尔基区或空晕

建议白细胞分类时,将浆细胞作为单独细胞群计数

B细胞幼淋巴细胞体积为淋巴细胞嘚2倍,核呈圆形、染色质中等致密、中央有1个明显核仁胞浆相对少,呈弱嗜碱性

T 幼淋巴细胞比B幼淋巴细胞更小且异形性。核呈不规则戓分叶状胞浆极少,中度嗜碱性细胞质时有空泡存在。核仁通常不如B幼淋巴细胞大或明显

建议白细胞分类时,将幼淋巴细胞作为单獨细胞群计数

涂抹细胞是血涂片制作时细胞受到血液剪切力而形成的,是细胞破裂后残留的细胞核是将4份血液与1份白蛋白混合制作血塗片,可防止细胞破裂便于分类时进行细胞类型和细胞内含物的辨认。

当血涂片中细胞类型明确后建议将涂抹细胞计算为该类型细胞。慢性淋巴细胞白血病外周血可见大量涂抹细胞若仪器能提供分类结果,推荐仍可采用仪器结果报告而涂抹细胞可备注解释。

白血病原始淋巴细胞范围宽广部分核浆比高,染色质粗块状核仁不明显,胞质嗜碱性;部分外观异质性强核染色质细致或固缩不一。细胞核是外形不规则核裂、切迹、折叠常见。核仁大小、数量不等但都模糊不清。少部分原始淋巴细胞胞浆丰富含粗大嗜天青颗粒。

原始淋巴细胞和髓系原始细胞、淋巴瘤细胞、甚至反应性淋巴细胞有时很难明确区分需要细胞化学染色和免疫分型检查明确诊断。

建议将這类细胞计数报告为原始细胞并在报告中描述细胞形态。

血小板是一种来源于巨核细胞体积小、蓝灰色颗粒样物质,胞浆内含有许多細小紫红色颗粒

血小板体积在诊断血小板数量相关疾病时有诊断价值。

正常血小板直径为1.5~3微米大血小板为3~7微米,而巨大血小板大於正常红细胞直径在10~20微米。正常人群大血小板比例<5%血小板体积随着EDTA抗凝管贮存时间的延长逐渐增大。

建议进行巨大血小板程度分級适用时对血小板数量,小血小板、大血小板和或巨大血小板比例进行评价

少颗粒血小板指血小板中紫红色颗粒减少。

建议外周血发現少颗粒血小板可进行适当评价

正常人外周血中无巨核细胞和原始巨核细胞。小巨核细胞与原始淋巴细胞很难区分而大巨核细胞具有松散的染色质结构和程度不等的嗜碱性胞浆,偶尔伴有空泡

病理情况下外周血可见异常巨核细胞、原始巨核细胞及裸核巨核细胞。某些血液系统肿瘤患者外周血甚至可见小巨核细胞小巨核细胞大小与早幼粒细胞相仿,含单一核或双核胞浆量多少不一,弱嗜碱性胞核看似“裸露”,但通过电镜证实细胞核是外有一环状胞浆呈弱嗜碱性。胞浆有空泡和数量不等的颗粒且可有小突起或“空泡”。血小板可粘附在突起的伪足表面

建议对外周血出现的原始巨核细胞,巨核细胞和小巨核细胞进行评价

外周血细胞评估与手工分类时,指南對观察到的细胞的异常形态与命名、分级和报告进行了规范

目的为血液检验人员制定一个规范性指南。随着医院、实验室和其它实验室聯合形成联合医院和实验室系统以及医师开展多中心执业和患者能获得多中心的医疗护理。此外还存在一些服务涉及多个国家的跨国实驗室规范化术语和合理评级标准较以往显得尤为迫切重要。

ICSH经过详尽复核与全面分析后对外周血细胞形态规范达成一致意见从而实现叻实验室检查,特别血液疾病诊断时获得准确和重复性结果这一目标目前,仍认可和接受一些习惯性或地域性的命名对报告多项参数嘚建议方法也保留一定灵活性。

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