抗衰老、做抗氧化abts用什么配应该怎么做?

组织细胞总做抗氧化abts用什么配能仂检测试剂盒(ABTS法) E2016

组织细胞总做抗氧化abts用什么配能力检测试剂盒(ABTS法)

CapacityTAOC)的试剂盒。机体中存在多种做抗氧化abts用什么配物包括做抗氧化abts用什么配大分子、酶和做抗氧化abts用什么配小分子等,可以清除体内产生的各种活性氧以阻止活性氧诱导的氧化应激(Oxidative stress)的产生。一個体系内的各种做抗氧化abts用什么配大分子、做抗氧化abts用什么配小分子和酶的总的水平体现了该体系内的TAOC

储存:-20℃储存,12个月有效

细胞样品的准备:收集新鲜细胞(如果是贴壁细胞请用细胞刮刮下,不宜使用胰酶和EDTA消化)PBS洗涤细胞一次,离心收集细胞吸尽上清。加入200μl预冷的组织细胞裂解液超声破碎细胞释放其中的做抗氧化abts用什么配物。4℃10000g离心10分钟。取上清用于总做抗氧化abts用什么配能力的测定不立即测定的样品可以-70℃保存。如果样品中总做抗氧化abts用什么配能力超出测定范围可利用组织细胞裂解液适当稀释后测定,稀释倍数请通过預实验确定

1.2 组织样品的准备:取20mg组织,加入400μl的预冷的组织细胞裂解液用匀浆器冰浴匀浆。4℃10000g离心10分钟。取上清用于总做抗氧化abts用什么配能力的测定不立即测定的样品可以-70℃保存。如果样品中总做抗氧化abts用什么配能力超出测定范围可利用组织细胞裂解液适当稀释後测定,稀释倍数请通过预实验确定  

总做抗氧化abts用什么配能力检测工作液的配制:按比例混合ABTS溶液和氧化剂溶液,室温避光放置6小时;嘫后利用PBS稀释30-50倍测定A734nm,根据吸光度值调整稀释倍数至吸光度A734nm为0.7±0.05,即为总做抗氧化abts用什么配能力检测工作液

利用PBS将10mM的Trolox溶液稀释成1、0.5、0.25、0.125、0.062、0.031 mM浓度的Trolox溶液,用于标准曲线测定每次测定新鲜配制系列标准品稀释液。

4.1使用96孔板依次加入总做抗氧化abts用什么配能力检测工作液、样品或标准品后,混匀室温孵育5分钟。

4.2孵育结束后利用酶标仪测定A734nm。如果样品吸光度过低可适当稀释样品后测定,如果样品吸咣度无明显下降可适当冷冻干燥浓缩样品后测定。

利用标准品浓度为横坐标吸光度值为纵坐标制作Trolox做抗氧化abts用什么配能力标准曲线,並获得横纵坐标之间的函数关系式然后利用各样品的吸光度值计算样品的总做抗氧化abts用什么配能力。对于细胞和组织样品可以根据样品中蛋白浓度测定,计算每毫克蛋白中总做抗氧化abts用什么配能力

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