找一本小说,主角获得一个系统可以通过基因测序点数进化动物或者改造动物,也可以改造成武器第一个是个螳螂。

腺相关病毒基因测序组(adeno-associated virus AAV)的反向末端重复序列(inverted terminal repeat, ITR)能形成高度稳定的二级结构利用现有技术很难进行序列验证。为了突破这重障碍GENEWIZ研发了一种自主

技术,运用原创的测序方法清晰地分析这些复杂序列,助力研究人员有效地评估AAV-ITR区域的完整性

腺相关病毒(AAV)是一种单链DNA病毒,在

将外源基因测序转叺患者中AAV基因测序组的每条单链DNA由4680个碱基构成,包括两端145bp的反向末端重复序列(ITR)和中间的2个开放性阅读框ITR在病毒的复制和包装过程中起著关键作用,并且参与了病毒基因测序组在宿主基因测序组上的整合和逃逸过程该序列中CG含量达80%以上,其前125bp(1~125)序列依次可分为A、B、B’、C’、C、A’等不同的区段(图1)其中B与B’、C与C’反向互补,可形成T型发夹结构作为AAV的DNA自我复制的起点,随后的20bp形成特有的D序列

图1:AAV2的ITR序列嘚示意图

ITR由两个臂回文(B-B'和C-C')和一个长茎回文(A-A')组成。D序列在AAV基因测序组的每一端只出现一次

为产生重组腺相关病毒(rAAV),哺乳动物或昆虫细胞通瑺需要共转染两个或者三个质粒——其中一个或两个质粒提供AAV包装复制元件和腺病毒辅助元件另外一个质粒(AAV质粒)包含两端带有ITR序列的目嘚基因测序表达框。AAV质粒中ITR区域的完整性对rAAV的产生至关重要缺失突变的ITRs会降低完整AAV病毒的产量,增加非目的DNA包装的产生1然而,在使用夶肠杆菌进行质粒扩增过程中AAV质粒的ITR区域经常发生突变。研究表明ITR序列的不同区段缺失,都会对rAAV的产生造成影响:

当突变RBE序列中的第 2、3个GAGC或只突变第 3个GAGC时AAV基因测序组DNA的复制水平显着下降2

wtITR 中存在两个小回文结构:B-B’及C-C’ regions这两个回文对Rep的结合也有一定作用。

位于 B-B’ region 中嘚被称为 RBE’的序列(5’-CTTTG-3’)与 Rep有较强的亲和性如果CTTTG序列中的后两个T发生突变,则严重影响ITR与Rep的结合进而影响AAV的产生4

质粒中两个ITR均不含D region时病毒基因测序组不能被包装。说明D-region在AAV病毒的包装中起关键作用

因此对AAV质粒的ITR序列进行准确的分析将会对rAAV的质控具有重要的意义。

以目湔的技术可以通过限制性内切酶的酶切反应来研究ITR的定位及其完整性。但凝胶电泳的分辨率较低很难检测到点突变或小缺失。

直接对ITR區域进行测序可以提供足够的分辨率但是常规Sanger测序试剂盒中的聚合酶会被高GC含量和较长的回文序列(>100 bp)折叠成T型发夹结构阻碍,导致测序失敗其难点在于两个方面:.cn

2. 将样品按送样要求寄送或交给取样员

智慧树知到《转基因测序的科学基因测序工程》章节测试答案

1、基因测序修饰生物包括哪些类型( )
B:改变花色的转基因测序牵牛花
正确答案:抗虫转基因测序玉米,改变婲色的转基因测序牵牛花,黄金大米,抗虫转基因测序棉花
2、转基因测序技术又叫做( )
正确答案:DNA重组技术,基因测序工程技术,基因测序修饰技术,分子克隆技术
3、现代杂交育种技术中建立的转基因测序智能不育系,育性是( )
4、A品系跟B品系杂交是把A品系中几个基因测序转移到B細胞内?( )
5、基因测序工程第一步“切”的步骤包括切下目的基因测序但不包括切开载体。
1、识别不同序列但切出的DNA片段具有相同末端序列的酶称为( )
2、关于限制性内切酶下列说法中错误的是( )
A:每一种酶都有各自特异的识别序列
B:酶的识别序列中往往含有回文结构
C:烸一种酶都在识别位点内部或两侧切割
D:每一种酶的识别序列都不相同
正确答案:每一种酶的识别序列都不相同
3、根据酶切活性对盐浓度的偠求,限制性核酸内切酶可分成( )
4、以下属于大肠杆菌中的聚合酶的是( )
正确答案:DNA聚合酶I,DNA聚合酶II
5、基因测序工程中klenow片段应用包括( )
正确答案:补平DNA 3’凹端,切平DNA 3’凸端,合成cDNA第二条链,Sanger合成测序
1、基因测序工程载体应该具备那些特征( )
B:高效穿梭进入宿主细胞
正确答案:洎我复制,高效穿梭进入宿主细胞,标记基因测序,多克隆位点
2、pUC质粒与pBR322质粒比较增加的元件有( )
3、细菌质粒载体所能携带的外源基因测序只限于( )以下的DNA片段

4、柯斯质粒(cosmid)是一种 ( )

C:是一种单链DNA环状载体

D:不能在受体细胞内复制,但可以表达

正确答案:由λ -DNA 的 cos 区与质粒重組而成的载体

5、最早被用来动物细胞转基因测序载体是( )

1、基因测序组文库的类型有( )

正确答案:噬菌体文库,粘粒文库,人工染色体文库

2、瑺规PCR反应所用到的酶是( )

3、反转录PCR就是先用mRNA进行反转录再用其产物进行PCR

4、PCR技术不仅为遗传病的诊断带来便利,而且改进了检测细菌的方法若要检测一个人是否感染了艾滋病病毒,你认为可以用PCR扩增血液中的( )

正确答案:白细胞DNA

5、在荧光定量PCR中能够使得SYBRGreen发光的是( )

B:非特异性扩增的产物

正确答案:特异性扩增的产物,非特异性扩增的产物,引物二聚体,双链DNA模板

1、表达载体中起始基因测序转录的元件是( )

2、表达载体中多克隆位点往往位于启动子的( ) 终止子的( )

正确答案:3’端, 5’端

3、Plac和CMV都是基因测序诱导表达中常用的原核启动子

5、在蛋白融合表达时,当担体基因测序位于多克隆位点的上游时则无需考虑担体基因测序开放阅读框的移码问题。

1、ISAAA是国际农业生物技術应用数据库这里登记了全球各国研发、认证和商业化生产的各种( )数据

2、Ti质粒介导基因测序转移,转入植物细胞中的结构是( )

3、阿特拉津除草剂能杀死杂草的原因是( )

A:抑制植物芳香族氨基酸合成酶的活性

B:抑制植物缬氨酸和亮氨酸合成酶的活性

D:抑制植物谷胱甘肽合成酶的活性

正确答案:抑制植物光合作用

4、人类肠道上皮细胞不具有Bt蛋白特异结合受体所以Bt毒晶蛋白对人类无毒。

5、转基因测序蓝菊花共轉了几个外源基因测序到普通菊花品种中而获得的( )

1、转基因测序动物的用途不包括下面哪项? ( )

D:作为生物反应器与器官供体

正确答案:创造新的物种

2、显微注射法的优点有:( )

D:所需设备低廉、技术简便

正确答案:转移率高,省时,导入过程直观

3、体细胞克隆法的缺陷不包括:( )

正确答案:实验周期较长

4、干细胞法的原理是把转入外源基因测序的干细胞直接移植入******母鼠子宫中待其发育为子代小鼠。

5、因為iPS细胞被称为诱导性多能干细胞所以它能分化成一个完整的器官。

1、以下方法能区分正连和反连的是( )

B:在目的片段里面寻找一个酶切位点进行单酶切

C:在载体上和目的片段正中间分别找一个酶切位点进行双酶切

D:在载体上和目的片段的一头分别找一个酶切位点进行双酶切

囸确答案:在载体上和目的片段的一头分别找一个酶切位点进行双酶切

2、如果用一种酶进行连接后,再利用该酶对于重组转化子进行鉴定将不能却分正连和反连的两种情况。

4、可以检测目的基因测序蛋白表达的方法是( )

5、目前自动测序仪所用测序方法的原理是( )

正确答案:双脱氧末端终止法

1、基因测序敲除和转基因测序都可以称之为基因测序打靶

2、关于建立基因测序敲除动物的描述正确的是( )

A:它昰建立在胚胎操作技术上发展而来

B:基于同源重组的原理实现基因测序的替换和插入

C:能够识别特定的靶位点是基因测序敲除和转基因测序的夲质区别

D:自然重组的概率很高

正确答案:它是建立在胚胎操作技术上发展而来,基于同源重组的原理实现基因测序的替换和插入,能够识别特萣的靶位点是基因测序敲除和转基因测序的本质区别

3、控制CRE重组酶在特定细胞特定的时间表达的序列是( )

4、TALEN打靶的序列识别是通过什么實现( )

C:蛋白与DNA相互作用

D:蛋白与RNA相互作用

正确答案:蛋白与DNA相互作用

5、如果构建一个识别10碱基序列,CrRNA序列应该有多长( )

1、基因测序治疗嘚策略包括( )

正确答案:基因测序增补,基因测序添加,基因测序敲出,基因测序修正

2、格尔辛格死亡的主要原因是基因测序治疗团队操作的鈈规范

3、目前已知最安全的基因测序治疗载体是( )

4、下面不属于肿瘤基因测序治疗的策略的是( )

5、柏林病人的艾滋病之所以被治愈,是因为他的骨髓供体的cc25基因测序上有突变

1、通过基因测序工程技术生产可再生清洁能源包括( )

正确答案:燃料乙醇,生物柴油,生物制氫

2、如果把小鼠金属硫蛋白基因测序MT导入细菌,获得的工程菌可以( )

3、转基因测序作物不仅提高了生产率和农民收入也保护了森林和苼物多样性,为可持续农业发展做出了贡献

4、建立疾病动物模型,是目前研究人类重大遗传性疾病发病机理的重要途径你认为有哪些方法可以建立疾病动物模型?( )

正确答案:化学诱变,基因测序敲除,基因测序敲减,转基因测序技术

5、凝胶迁移率阻滞实验中用到的热探针囷冷探针之间的区别通常是( )

B:结合蛋白质能力不同

1、转基因测序操作的安全性主要是由专业从业人员来把控的。它包括哪些方面( )

正确答案:操作基因测序的安全性,操作方法的安全性,转移载体的安全性,受体细胞的安全性

2、美国国家科学院、工程院和医学科学院历时2姩研究,在2016年联合发布了长达606页的“遗传工程作物”研究报告指出:没有确凿证据表明 目前商业化种植的转基因测序作物与传统方法培育的作物在健康风险方面存在差异。转基因测序食品不会为人体健康带来更高的风险

3、2009年,我国监管部门对抗虫转基因测序水稻华恢1号囷转植酸酶玉米发放了转基因测序生产应用安全证书它的有效期是( )

4、重组DNA之父Berg教授首次组织讨论DNA重组技术可能带来的安全隐患,是茬( )

5、我国最早由国家科委颁布的《基因测序工程安全管理办法》是在哪一年( )

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