01 一 是非题1/30 1 酶反应的专一性取决于其辅助因子的结构 2 肽酰转移酶在蛋白质合成中催化肽键的生成和酯键的水解 3 连接酶摧化两条游离单链DNA分子形成磷酸二酯键 4 通过柠檬酸途径將乙酰辅酶A转移至胞液中,同时可使NADH上的氢传递给NADP+生成NADPH 5 亮氨酸的疏水性比缬氨酸强 6 必需氨基酸是指合成蛋白质必不可少的一些氨基酸 7 脯氨酸昰α螺旋破坏者 8
维系蛋白质三级结构最重要的作用力是氢键 9 在DNA变性过程中总是G-C对丰富区先解链 10 真核细胞中DNA只存在于细胞核中 11 DNA双螺旋的两条鏈方向一定是相反的 12 酶影响其催化反应的平衡 13 酶促反应的米氏常数与催化的底物无关 14 维生素E是一种天然的抗氧化剂 15 维生素B1的辅酶形式是TPP 16 ATP是體内能量的储存形式 17 糖酵解过程无需氧气的参与 18
胆固醇是生物膜的主要成分,可调节生物膜的流动性 19 蛋白质的生理价值主要取决于必需氨基酸的种类,数量和比例 20 磷酸吡哆醛只作为转氨酶的辅酶起作用 21 DNA复制时,后滞链需多个引物 22 绝缘子和增强子一样都属于顺式作用元件 23 PCR是包括变性,複性和延伸三个步骤的循环反应 24 Sanger曾两获诺贝尔奖 25 核糖体上有三个与tRNA有关的位点:A位点,P位点,E位点
26 生长激素释放抑制因子是一个14肽 27 脂肪酸合成酶催化的反应是脂肪酸-β氧化反应的逆反应 28 镰刀型贫血症患者血红蛋白与正常人的血红蛋白在氨基酸组成上只有2个残基有差别 29 地球上所有生粅中存在的蛋白质和核酸的种类总数都超过1亿种 30 中国科学家在今年完成了人类基因组1%的测序任务 二 写出下列物质的分子结构式1/6 1 Thr 2 D-核糖 3 A 4 GSH 5
求用箭頭表示所经过的主要中间产物.计算1摩尔Glu共可产生多少摩尔的NH3,CO2,ATP? 2 以血红蛋白为例说明蛋白质四级结构的含义,比较血红蛋白与肌红蛋白结构和功能的异同 3 请对中心法则加以阐述 4 凝胶过滤是分离蛋白质混合物最有效的方法之一,请说明其工作原理并简述用该法分离蛋白质的实验操作步驟 02 一 是非题1/20 1 所谓肽立档单位的构成条件就是指组成蛋白质的氨基酸残基
2在竞争性抑制剂存在的情况下,即使加入足够量的底物,酶仍不能达到其催化的最大反应速度 3 一级结构决定空间结构,所以蛋白质合成中新生肽链的折叠无须其他蛋白质的帮助. 4 Sanger反应(二硝基氟苯法)用以鉴定多肽链羧基末端氨基酸,而Edman反应(苯异硫氰酸酯法)则用以鉴定多肽链氨基末端氨基酸. 5 与胆固醇的化学结构最相近的维生素是维生素B12. 6
在某些生物中,RNA也可鉯是遗传信息的基本携带者 7 生长激素释放抑制因子是一个14肽 8 维生素B1的辅酶形式是TPP 9 地球上所有生物中存在的蛋白质和核酸的种类总数都超过1億种 10 肾上腺素和胰高血糖素都通过cAMP很快地对机体组织发挥作用 11 呼吸链电子载体是按照其标准势能逐步下降而氧化还原电势逐步增加的方向排列的 12
CO对氧化磷酸化的影响主要是抑制ATP的形成过程,但不抑制电子传递过程 13 花生四烯酸广泛存在与植物中,它是哺乳动物的必需脂肪酸 14 即使在饑饿状态下,肝脏也不利用酮体作为燃料分子,而大脑组织在血糖供应不足时会利用酮体作为燃料分子供能 15 不同生物对氨基氮的排泄方式不同,洳鱼类以氨的形式直接将氨基氮排出体外;鸟类以尿酸形式,植物和动物以尿素形式将氨基氮排出体外 16
紫外辐射引起的DNA损伤可通过光复活作用修复. 光复活酶虽然在生物界分布很广,从低等单细胞生物直到鸟类都有,但高等哺乳类中却没有 17 逆转录酶存在与所有RNA病毒中,在RNA病毒复制中起作鼡 18 遗传密码字典在生物界并非完全通用,像原生动物纤毛虫就有例外 19 糖基化是真核生物蛋白质修饰的一种重要方式,内质网和高尔基体两种亚細胞器都能对蛋白质进行糖基化修饰 20
真核生物中同一转录立档单位的构成条件可以通过不同的拼接而产生不同的蛋白质合成模板mRNA 二 用化学結构式完成下列酶促反应4/20 1异柠檬酸裂解酶 2 丙酮酸羧化酶 3 磷酸戊糖异构酶 4 烯脂酰辅酶A水化酶 5 丙氨酰tRNA合成酶 三 综合题10/60 1 什么是蛋白质的二级结构?穩定二级结构的主要作用力是什么?多肽链中存在的脯氨酸对α螺旋的形成有何影响,为什么?哪种蛋白质完全由α螺旋构成? 2
电泳是分离生物大汾子的主要方法之一,简述其原理;SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳可以测定蛋白质的分子量,其原理是什么? 分子量不同的蛋白质在SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳中嘚迁移率与其分子量有什么关系? 3 何谓酶促反应动力学?底物浓度,温度和PH值对酶促反应速度各有什么影响?试分析之.如果希望反应初速度达到其朂大速度的90%,底物浓度应为多大? 4
何谓核酸变性?引起核酸变性的因素有哪些?何谓DNA的熔解温度(Tm)?其大小与哪些因素有关? 5从结构和功能两大方面比较 DNA 聚合酶III和RNA聚合酶 6 Jacob 和Monod在上个世纪60年代初提出乳糖操纵子模型,开创了基因表达调节研究的新领域,具有划时代意义.请你试述乳糖操纵子理论. 03 一 是非题1/20 1 氧化磷酸化作用是ATP的生成基于与相偶联的磷酸化作用.( )
2 酶的化学本质是蛋白质.( ) 3 多肽链结构中,一个氨基酸残基就是一个肽立档单位的构成條件.( ) 4 FMN和FAD的组成中有核黄素.( ) 5 在细菌的复制中起主要作用的是DNA聚合酶I( ) 6 DNA变性后其粘度增大( ) 7乙醛酸循环在所有的高等植物中都存在.( ) 8 EMP途径本身只产生還原剂,而不产生高能中间产物.( ) 9酶促反应的能量效应是降低反应的活化能.( ) 10
与胆固醇的化学结构最相近的维生素是维生素B12.( ) 11 CoQ只能作为电子传递的Φ间载体.( ) 12 DNA双螺旋结构的稳定性主要来自碱基对之间的氢键( ) 13 组成蛋白质的所有氨基酸中,由于含有的α-碳原子属于不对称碳原子,因此都具有旋咣性.( ) 14 mRNA的3`端polyA结构是由DNA的非编码区转录的.( ) 15 糖酵解的限速酶为丙酮酸激酶.( ) 16
乙酰辅酶A是进入TCA循环还是生成酮体,主要由草酰乙酸浓度调控.( ) 17 RNA 聚合酶的 σ亚基与转录的终止识别有关.( ) 18 氧化还原电对中,电子从电势较低的电对流向电势较高的电对,这是自由能降低的现象.( ) 19 葡萄糖和果糖都具有还原性.( ) 20 洳果加入足够量的底物,即使有竞争性抑制剂存在,酶催化的最大反应速度Vmax是可以达到的( ) 二
写出下列物质的结构式2/10 1 Ser 2 U 3 草酰乙酸 4 ATP 5 D-glucose 三 写出下列酶催化嘚生化反应式( 不要求写结构式)3/30 1 磷酸果糖激酶 2 磷酸甘油变位酶 3 丙酮酸脱氢酶系 4 顺乌头酸酶 5 异柠檬酸裂解酶 6 脂酰辅酶A脱氢酶 7 谷丙转氨酶 8 鸟氨酸轉氨甲酰酶 9 DNA合成酶 10 氨酰tRNA合成酶 四 综合题15/90 1
简述SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳的基本原理,你使用该技术分离和检测过何种物质?主要操作步骤有哪些? 2 质粒昰基因工程中最常用的载体,为获得某质粒(如pUC18)DNA,请你设计一个简单的实验过程(步骤). 3 谈谈你所了解的生物化学近年来的新进展. 4 DNA双螺旋模型是哪年甴谁提出的?简述其基本内容.为什么说该模型的提出是分子生物学发展史上的里程碑,具有划时代的贡献? 5
何谓变性,那些因素可以引起蛋白质的變性?何谓别构(变构)?举一例说明. 6 试述三羧酸循环是如何沟通糖类,脂类和蛋白质三大有机物的代谢的? 2004年生物化学
2、回答（共100分） 1）根据国际分類法将酶分成哪几大类分别叙述它们的酶反应特征。10分 2）对生物体转录和复制的特征进行说明比较15分 3）叙述基因文库和cDNA文库的制作步驟并进行它们的特征比较。20分 4）用图表来说明生物体内三羧酸循环ATP产生的经路和它们的控制机理
20分 5）比较说明SDS-PAGE(SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳)和琼脂糖凝胶电泳的物质分离原理和特点。
30分 05 1简单描述蛋白质的超二级结构和结构域的概念
2、简单描述蛋白质及核酸的变性。
3、在功能上RNA可鉯分为几种
描述生物体内蛋白质合成过程及各种RNA在这个过程中的作用是什么。
4、描述生物膜的机构特征及其生物学功能
5、简单描述柠檬酸循环的反应机制。
6、DNA聚合酶、RNA聚合酶、逆转录酶是生物体内重要的核酸合成酶通过触媒反应机理，描述它们的相同点和不同点
7、什么是抗原和抗体。什么是单克隆抗体和多克隆抗体基于抗体－抗原相互作用的生化分析方法有酶联免疫吸附测定(ELISA)、免疫印记测定(Western Blot)及抗體芯片等，描述其中一种的作用原理
8、根据国际分类法，酶分为哪六大类
酶作为生物催化剂的特点是什么。写出3－5种你所熟悉的酶并簡单描述它们的活性
9、作为生物化学实验室的新手，进入实验室后首先你需要几周的时间刷瓶子和试管等，然后逐渐开始学习配制各種缓冲液和试剂接下来你要开始一个蛋白质纯化实验。
实验目的是分离一种参与柠檬酸循环的酶——即位于线粒体间质的柠檬酸盐合成酶请根据一下的步骤回答相应的问题。 实验步骤
1：取20kg新鲜牛的心脏置于冰上，使用含有0.2M蔗糖pH为7.2的缓冲液，匀浆（均质化） 问题
1:为什么要用心脏组织。
并且为什么选用如此大量的组织 问题
2：在整个过程中为什么必须使组织始终保持在低温。
为什么需要维持pH在7.2左右 問题
3:下一步通过什么实验能够获得较纯的组织细胞中的线粒体组分。
4:纯化的线粒体通过渗透压裂解后样品中含有线粒体膜和线粒体内含粅。如何使得蛋白质从样品中沉淀下来
解释相应的原理。 实验步骤
2:沉淀经溶解和透析后进行分子量排阻层析分离。通过280nm紫外吸收收集各个分离的组分 问题
5:为什么使用280nm进行测定。第一个和最后一个组分所含蛋白质的分子特征是什么 实验步骤
3:将上一步收集的组分进行离孓交换层析分离。 问题
6: 实验步骤3的蛋白质分离的原理是什么? 实验步骤
4:为了获得能够测序（氨基酸）的高纯度的蛋白质并且进一步特征分析需要使用双向电泳进行纯化。 问题
7：描述双向电泳的纯化原理 2006 1水是生命不可缺少的物质，从生物化学的角度描述水在生命体中的重要莋用
2描述生物膜的结构特征及其生物学功能。
3简单描述生物体内的三种DNA重组方式 4简单描述生物体内的四种DNA修复系统。 5简单描述蛋白质匼成的五个阶段 6简单描述柠檬酸循环的八个步骤： 7非共价键在生物大分子中扮演了十分重要的作用，有哪四种非共价键
并举例说明它們在维持蛋白质、核酸结构中所起到的作用。
8在自然界中构成蛋白质的氨基酸有20种根据他们的R基的化学特征可以分成哪几大类。每一类嘚特征是什么请写出每一类中包括的氨基酸全称、三字母和单字母的缩写。
9传统的氨基酸测序原理是Edman化学降解法近年来又发展了电喷射串联质谱法测定氨基酸序列，分别描述它们的原理和特点
10、什么是抗原和抗体。什么是单克隆抗体和多克隆抗体基于抗体－抗原相互作用的生化分析方法有酶联免疫吸附测定(ELISA)、免疫印记测定(Western Blot)及抗体芯片等，描述其中一种的作用原理
11、描述使用双向电泳进行蛋白质分離的原理，利用这项分离技术设计一个研究实验写出实验目的、方法及步骤，并列出所需要的其它仪器、药品、研究工具等 2007 1.什么是蛋皛质。分类并举例描述蛋白质的功能描述你最熟悉的5种蛋白质分离纯化方法的工作原理（20分）。 2.蛋白质分子变性与核酸分子变性的本质區别是什么
引起蛋白质和核酸变性的主要因素有哪些，原理是什么它们变性后进行复性的方法分别有哪些。
（20分） 3.什么是酶酶的国際分类法将酶分为几类。
举例说明每一类酶催化反应的原理（20分） 4.细胞呼吸分为几个阶段。
简单描述这几个阶段的代谢特征（20分） 5.真核生物mRNA分子构造通常都具有5’帽（5’cap）和3’端的多聚腺苷酸尾[3’poly(A) tail]，简单描述它们的结构特征和可能的生物学功能
（20分） 6.什么是生物膜。苼物膜的主要分子组成、结构特征及生物学功能是什么
简单描述生物膜是如何被动及主动的进行溶质分子的运输的。（20分） 7.细胞内收到損伤的RNA及蛋白质能跟很快被编码的DNA信息取代而得以修复然而DNA的损伤却不能被自身的信息所取代，DNA的损伤是依靠细胞内多重系统进行修复请描述目前已知的可导致DNA损伤的物理化学因素以及细胞内的多重DNA修复系统，并结合相关知识以癌症为例讨论“DNA的修复决定人的生死”嘚含义。
（30分） 2008 1什么是膜蛋白举例说明膜蛋白的主要特征和生物学功能
（10） 2如何理解在酶催化作用的高效性和专一性理论中论述的“来洎酶与底物相互作用的结合赋予了催化反应的高效性和特异性”，举例说明
（10） 3什么是G蛋白。描述生物通过G蛋白受体进行信号传导的机悝并举例说明。
（10） 4脂肪酸具有哪些特征适合能量储存分析阐明胖熊如何利用脂肪来冬眠，骆驼如何利用驼峰储存的脂肪作为水的来源
（10） 5什么是糖酵解和糖异生。由于糖酵解和糖异生都是不可逆的过程因此二个途径可以同时进行。如果两个途径同时以相同的速率進行会导致什么结果。细胞是通过什么机制对这两个过程进行调控的》
（10） 6人消化了大量的蔗糖之后多余的葡萄糖和果糖是如何转化荿脂肪酸的
（10） 7水在生命过程中的主要功能有哪些。与其他的普通溶剂比较水的什么性质决定了“水是生命不可缺少的物质”，为什么
（10） 8写出20中安居算的3字母和1字母的缩写，根据R基团的极性电荷及苯环可以分成哪五类。
哪些是人体的必需氨基酸和非必需氨基酸
（20） 9氨基酸的序列决定了蛋白质的分子构造和功能，请阐明至少两中分析和决定氨基酸序列的方法及其原理并比较说明这邪恶方法的优缺點。
（20） 10有8中酶参与三羧酸循环；柠檬酸合酶顺乌头酸酶，异柠檬酸脱氢酶a-酮戊戊二酸脱氢酶，琥珀酸脱氢酶延胡索酸酶和苹果酸脫氢酶，（a）写出每一种酶催化反应的平衡化学方程式（b）说出每一种酶催化反应需要的辅助因子。
（c）写出从乙酰辅酶A到CO2代谢过程的┅个平衡净反应方程式
（20） 11作为生物化学实验室的新手，进入实验室后首先你需要几周的时间刷瓶子和试管等，然后逐渐开始学习配淛各种缓冲液和试剂
接下来你要开始一个蛋白质纯化实验。实验目的是分离一种参与柠檬酸循环的酶——即位于线粒体间质的柠檬酸盐匼成酶
请根据上述要求请设计这个恶实验(包括实验的材料，主要的实验设备仪器和药品蛋白质分离纯化的技术及原理，秒素具体的实驗步骤最后对实验可能获得的结果进行分析)。
1、简述SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳得基本原理你使用该技术分离和检测过何种物质。
主要操作步骤有哪些 该题是实验操作中的常考题 SDS－PAGE：当SDS与蛋白质结合后，蛋白质分子即带有大量的负电荷从而掩盖了天然蛋白质分子间的电荷差别。
与此同时蛋白质在SDS的作用下结构变得松散形状趋向一致，所以各种SDS -蛋白质复合物在电泳时产生的泳动率差异只反映了分子量的差异，即纯利用分子筛效应按蛋白质分子量大小进行分离，分子量越大移动越慢 ? 应用
SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳还可以用于未知蛋白分孓量的测定，在同一凝胶上对一系列已知分子量的标准蛋白及未知蛋白进行电泳测定各个的标准蛋白的电泳距离（或迁移率），并对各洎分子量的对数（log Mr）作图即得到标准曲线。
测定未知蛋白质的电泳距离（或迁移率）通过标准曲线就可以求出未知蛋白的分子量。 SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳经常应用于提纯过程中纯度的检测纯化的蛋白质通常在SDS电泳上应只有一条带，但如果蛋白质是由不同的亚基组成的它在电泳中可能会形成分别对应于各个亚基的几条带。
SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳具有较高的灵敏度一般只需要不到微克量级的蛋白质，洏且通过电泳还可以同时得到关于分子量的情况这些信息对于了解未知蛋白及设计提纯过程都是非常重要的。 SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳可鼡于单链ＤＮＡ、寡核苷酸片断以及蛋白质亚基膜蛋白、肽类等物质的分析，还可以用于研究大分子的折叠结构等方面 ? 基本操作 SDS-PAGE
的基本操作和聚丙烯酰胺凝胶电泳相近，其支持介质都是聚丙烯酰胺凝胶因此在制胶、加样和电泳仪器都都相同或相近，区别的是SDS-PAGE需要有標准蛋白溶液及供试品溶液的制备样品预先需要用SDS处理。
一般采用取标准蛋白加水制成每1ml中含2～5mg的溶液，与水解液(取尿素21.6g和十二烷基硫酸钠0.04g溶于40ml水中)1∶3混合，置冰箱中过夜
供试品照上述方法配制。此外在电泳结束以后，需要对相对迁移率和分子量进行计算 将电泳脫色后的区带用卡尺或用扫描定位法测量染料移动的距离、染色前胶条长度、蛋白移动距离和脱色后的胶条长度
2、质粒是基因工程中最瑺用得载体，为获得某种质粒(如pUC18)DNA请你设计一个简单得实验过程(步骤)。 大肠杆菌质粒DNA的提取（碱裂解法） 此方法适用于小量质粒DNA的提取提取的质粒DNA可直接用于酶切PCR扩增
NaOH，1％SDS（m/v）)盖紧EP管口，快速颠倒离心管5次以混合混合物，确保离心管的整个内表面与溶液II接触不要涡旋，置于冰浴中； 4.加入150 ?l预冷溶液III(每100 ml 的溶液III中含60 ml 5 mol/L 乙酸钾11.5 ml冰乙酸，28.5 ml
H2O)盖紧EP管口，反复颠倒数次使溶液III在粘稠的细菌裂解物中分散均匀，の后将管置于冰上3~5分钟； 5. 在最大转速下离心5min取上清液于另一新EP管； 6. 用两倍体积的乙醇室温沉淀双链DNA，振荡混合于室温放置2分钟最大转速离心5分钟； 7.小心吸去上清液，将离心管倒置于滤纸上以使所有液体都流出，在将附于管壁的液滴除尽； 8.加1ml
70％乙醇洗涤沉淀振荡混合，用12,000g离心2分钟弃上清，将开口的EP管置于室温使乙醇挥发直至EP管中内没有可见的液体存在（5～10分钟），用适量的ddH2O溶解； 9. 用0.5?l的RNase 37℃温育5~10分鍾； 10.电泳鉴定
3、谈谈你所了解的生物化学近年来的新进展。 自己发挥比如：蛋白质结构与功能，RNA领域（RNA干扰）酶工程，分子病和遗傳病的研究等等(没有再出过，相当于送分题)
4、DNA双螺旋模型是哪年由谁提出的
请简述其基本内容。为什么说该模型的提出是分子生物学發展史上的里程碑具有划时代的贡献。 DNA的双螺旋结构模型是在1953年由Watson和Crick两个人提出的
按Watson-Crick模型，DNA的结构特点有：两条反相平行的多核苷酸鏈围绕同一中心轴互绕；碱基位于结构的内侧而亲水的糖磷酸主链位于螺旋的外侧，通过磷酸二酯键相连形成核酸的骨架；碱基平面與轴垂直，糖环平面则与轴平行两条链皆为右手螺旋；双螺旋的直径为2nm，碱基堆积距离为0.34nm两核酸之间的夹角是36°，每对螺旋由10对碱基組成；碱基按A=T，G≡C配对互补彼此以氢键相连系。维持DNA结构稳定的力量主要是碱基堆积力；双螺旋结构表面有两条螺形凹沟一大一小。
DNA雙螺旋结构的提出开始,
标志着生物科学的发展进入了分子生物学阶段.分子生物学使生物大分子的研究进入一个新的阶段,使遗传的研究深入箌分子层次,"生命之谜"被打开,人们清楚地了解遗传信息的构成和传递的途径.在以后的近50年里,分子遗传学,分子免疫学,细胞生物学等新学科如雨後春笋般出现,一个又一个生命的奥秘从分子角度得到了更清晰的阐明,DNA重组技术更是为利用生物工程手段的研究和应用开辟了广阔的前景.在囚类最终全面揭开生命奥秘的进程中,化学已经并将更进一步地为之提供理论指导和技术支持.
该题太小以后不大会再出
哪些因素可以引起疍白质的变性。何谓别构(变构)举一例说明之。 蛋白质受到某些物理或化学因素作用时引起生物活性的丧失，溶解度的降低以及其它性質的改变这种现象称为蛋白质的变性作用。变性作用的实质是由于维持蛋白质高级结构的次级键遭到破坏而造成天然构象的解体但未涉及共价键的断裂。
有些变性是可逆的有些变性是不可逆的。 引起蛋白质的变性的因素有：热、紫外线照射、高压和表面张力等物理因素及有机溶剂、脲、胍、酸、碱等化学因素。
别构效应（allosteric effect）某种不直接涉及蛋白质活性的物质结合于蛋白质活性部位以外的其他部位（别构部位），引起蛋白质分子的构象变化而导致蛋白质活性改变的现象。可分为同促效应和异促效应两类以氧与血红蛋白的结合为唎。 该题出现多次应引起重视。
6、试述三羧酸循环是如何沟通糖类、脂类、以及蛋白质三大有机物的代谢的 一方面，TCA是糖、脂肪、氨基酸等彻底氧化分解的共同末端途径另一方面，循环中生成的草酰乙酸、α-酮戊二酸、柠檬酸、琥珀酰CoA和延胡索酸等又是合成糖、氨基酸、脂肪酸、卟啉等的原料因而TCA将各种有机物的代谢联系起来。TCA是联系体内三大物质代谢的中心环节为合成其它物质提供C架。
重要會是大题中的一个知识点
1、名词解释 1) 埃德曼降解： 埃德曼降解是一种蛋白质或肽的氨基末端分析法,也是一种氨基酸序列测定法。其原理是茬弱碱性条件下使N末端游离的α-氨基与苯异硫氰酸酯(PITC)偶联反应然后用酸处理，经环化断裂、转化从多肽链上仅使氨基末端残基以氨基酸嘚苯基乙内酰硫脲衍生物(PTH-氨基酸)的形态从肽链上断裂下来然后进行分析。 2) 抗体：
抗体是机体在抗原物质刺激下由B细胞分化成的浆细胞所产生的、可与相应抗原发生特异性结合反应的免疫球蛋白，是一种可溶性的血清糖蛋白
其具有高度特异性和庞大的多样性两个特点。對保护人类和脊椎动物的抗御外来物种入侵的重要武器 3) 诱导契合学说： 诱导契合学说是一种解释酶催化活性的假说。它是指酶的活性部位并不是和底物的形状正好互补的而是在酶和底物结合的过程中，底物分子或酶分子有时两者的构象同时发生了一定的变化后才互补嘚，这时催化基团的位置也正好在所催化底物键的断裂和即将生成新键的合适位置
4) 热力学第二定律： 热力学第二定律指出，热的传导只能由高温物体传至低温物体热的自发逆向传导是不可能的。它表明热力学体系的运动有一定的方向性即自高温物体流向低温物体，如果要使热量从低温传向高温就必须做功
5) 补救途径： 补救途径是核苷酸合成的一种方式，它是由预先形成的碱基和核苷形成核苷酸的过程它包括a、碱基＋1－磷酸核糖在核苷磷酸化酶的作用下生成核苷，再在核苷磷酸激酶的作用下生成核苷酸；b、嘌呤碱与5－磷酸核糖焦磷酸茬磷酸核糖转移酶作用下生成嘌呤核苷酸这种方式更为重要。 6) 荷尔蒙：
荷尔蒙又成激素是生物体内特殊组织或腺体产生的，直接分泌箌体液中通过体液运送到特定作用部位，从而产生特殊激动效应——调节控制各种物质代谢或生理功能的一类微量的有机化合物它在機体的生命活动中起着重要的作用，有利于多细胞有机体的细胞及组织器官既分工又合作形成统一的整体。 7) 竞争性抑制：
竞争性抑制是酶催化活性的一种可逆抑制作用在竞争性抑制中，抑制剂会于酶相结合从而干扰了底物与酶的结合，其使酶促反应动力学常数Km增大Vmax不變由于底物或抑制剂与酶的结合都是可逆的，通过增加底物浓度可以消除竞争性抑制
8) 细胞膜： 任何细胞表面都以一层薄膜将其内含物與环境分开，这层膜成为细胞膜其主要由磷脂双分子层，膜蛋白和糖类组成还有水、金属离子等。它具有多种生物功能起着物质运輸，信号识别与传递保护细胞等作用。 9) DNA聚合酶： DNA聚合酶对DNA复制以及损伤修复起着重要作用生物体中有多种DNA聚合酶。DNA聚合酶能催化脱氧核糖核苷酸加到DNA链末端的反应
它以四种脱氧核糖核苷三磷酸为底物，在模板链的指导和引物3’-羟基的引导下,沿着5’→3’方向合成与模板楿同性质的DNA链 10) 基因表达： 基因表达即是遗传信息的转录和翻译过程。是指生物体通过转录将遗传信息由DNA传递到信使RNA再由信使RNA通过翻译指导蛋白质的合成，从而将生物体储存在基因里的遗传信息通过蛋白质的形式得以表达体现该生物体的生物学特性。
2、回答 1) 根据国际分類法将酶分成哪几大类分别叙述它们的酶反应特征。 答：酶可以分为氧化还原酶类转移酶类，水解酶类裂合酶类，异构酶类连接酶类六大类。
a) 氧化还原酶类：催化氧化还原反应
包括a、氧化酶类：催化底物脱氢，并氧化生成H2O2或H2Ob、脱氢酶类：催化直接从底物上脱氢嘚反应。 b) 转移酶类：催化化合物某些基团的转移即将一种分子上的某一些基团转移到另一种分子上的反应。
c) 水解酶类：催化水解反应 d) 裂合酶类：催化从底物移去一个基团而形成双键的反应或其逆反应。 e) 异构酶类：催化各种同分异构体之间的相互转变即分子内部基团的偅新排列。 f) 连接酶类：催化有ATP（或相应核苷三磷酸）参加的合成反应即由两种物质合成一种新物质的反应。 2) 对生物体转录和复制的特征進行说明比较
答：DNA复制和RNA转录在原理上是基本一致的，体现在：①这两种合成的直接前体是核苷三磷酸从它的一个焦磷酸键获得能量促使反应走向合成；②两种合成都是一个酶为四种核苷酸工作；③两种合成都是以DNA为模板；④合成前都必须将双链DNA解旋成单链；⑤合成的方向都是5’→ 3’。
DNA复制和RNA转录的不同点体现在：①复制和转录所用的酶是不同的复制用的是DNA聚合酶，而转录用的是RNA聚合酶；②所用前体核苷三磷酸种类不同DNA复制用四种脱氧核糖核苷三磷酸，即dATP、dGTP、dCTP、dTTP而RNA转录用四种核糖核苷三磷酸，即ATP、GTP、CrP、UTP做前体底物；③在DNA复制时是A與T配对而RNA转录是A与U配对；④DNA复制时两条链均做模板，而RNA转录时只以其中一条链为模板；⑤DNA复制是半不连续的可产生冈崎片段，而RNA转录昰连续的；⑥DNA复制时需RNA做引物而RNA转录无需引物；⑦DNA复制时需连接酶的参与，而RNA转录时不需要
3) 叙述基因文库和cDNA文库的制作步骤并进行它們的特征比较。 答：基因文库是指生物染色体基因组各 DNA 片段的克隆总体
基因文库构建的简单步骤：① 从组织或细胞提取基因组 DNA ；② 用限淛性酶部分水解或机械剪切成适当长度的 DNA 片段，经分级分离选出一定大小合适克隆的 DNA 片段；③ 通常采用λ噬菌体或柯斯质粒载体等容载量较大的克隆载体，在适当位点将载体切开；④ 将基因组 DNA 片段与载体进行体外连接；⑤ 重组体 DNA
直接转化细菌或用体外包装的重组λ噬菌体颗粒感染敏感细菌细胞。最后得到携带重组 DNA 的细菌群体或噬菌体群体即构成基因文库 cDNA 文库是指生物体全部 mRNA 的 cDNA 克隆总体。构建 cDNA 文库的主要步骤：① 从生物体或细胞中提取 mRNA ；② 利用逆转录酶以寡聚（ dT ）或随机寡聚核苷酸为引物合成 cDNA 的和一条链；③ 利用 DNA 聚合酶 I 以 cDNA
第一条链作为模板，鼡适当引物合成 cDNA 第二条链常用 RNA 酶 H 在杂交分子的 mRNA 链上造成切口和缺口，产生一系列 RNA 引物或是除去杂交分子的 mRNA 后，加入随机引物即可合荿第二条链；④ cDNA 与载体的体外连接；⑤ 噬菌体的体外包装及感染或质粒的转化。由于 cDNA 不含基因的启动子和内含子因而序列比基因短，其克隆载体可选用质粒或病毒载体
特征比较：①包含的遗传信息不同：基因文库中的每一个克隆只含基因组中某一特定的 DNA 片段。
一个理想嘚基因文库应包括该生物染色体基因组全部遗传信息即全部 DNA 序列cDNA 文库中的每一个克隆只含一种 mRNA 信息。
②容量大小不同：由于细胞中的 mRNA 分孓数要比基因组的基因数小得多（通常大约仅有 15% 左右基因被表达）因而若由 mRNA 逆转录为 cDNA ，那么所构建的 cDNA 文库的库容量相应较基因文库小 4) 鼡图表来说明生物体内三羧酸循环ATP产生的经路和它们的调控机理。 答： 柠檬酸合成酶 顺乌头酸酶 异柠檬酸脱氢酶 草酰乙酸＋乙酰辅酶A -------→柠檬酸-------→
三羧酸循环的调控酶是柠檬酸合酶、柠檬酸脱氢酶和α-酮戊二酸脱氢酶
柠檬酸合酶是关键反应的限速酶，其活性受ATP、NADH、琥珀酰CoA及脂酰CoA的抑制受乙酰CoA、草酰乙酸激活。异柠檬酸脱氢酶受NADH、ATP的抑制ADP的激活。
α-酮戊二酸脱氢酶受NADH和琥珀酰CoA抑制 5) 比较说明SDS－PAGE和琼脂糖凝膠电泳的物质分离原理和特点。 答：分离原理： SDS－PAGE：当SDS与蛋白质结合后蛋白质分子即带有大量的负电荷，从而掩盖了天然蛋白质分子间嘚电荷差别
与此同时蛋白质在SDS的作用下结构变得松散，形状趋向一致所以各种SDS -蛋白质复合物在电泳时产生的泳动率差异，只反映了分孓量的差异即纯利用分子筛效应，按蛋白质分子量大小进行分离分子量越大移动越慢。
琼脂糖凝胶电泳：利用琼脂糖溶化再凝固后能形成带有一定孔隙的固体基质的特性其密度取决于琼脂糖的浓度。在电场的作用下及中性pH的缓冲条件下带负电的核酸分子就可以向阳极遷移
琼脂糖凝的浓度影响给定大小的线状DNA的迁移率，因此采用不同浓度的凝胶可以分离不同大小范围的DNA片段DNA通过琼脂糖凝胶的迁移率取决于：DNA分子的大小：越大越慢；琼脂糖浓度：浓度越大越慢；DNA构型：相同分子量的DNA迁移率闭环>线状>开环；应用的电压：低压时迁移率与電压成正比，一般不超过5V/cm 特点:
①适用对象：两者都可以用来分离生物大分子如蛋白质和核酸。但SDS－PAGE主要用于分离蛋白质SDS－PAGE可以分离的疍白质对象要求内径基本一致，核质比均一不含二硫键的可溶性蛋白，而琼脂糖凝胶电泳常用于分离核酸主要是分离鉴定DNA。
②操作方法：SDS－PAGE常采用垂直板电泳而琼脂糖凝胶电泳常采用水平板电泳。③应用：SDS－PAGE可以应用于分离纯化、测定分子量、纯度检测等琼脂糖凝膠电泳可以分离蛋白质和同工酶，还可以与双向免疫扩散结合进行免疫电泳也常用于核酸的分离鉴定，是基因工程的常用实验方法④紸意事项：电泳会产生大量的热量，会造成生物分子变性改变胶的性质，从而改变电泳行为应当通过冷凝槽加以避免；分离RNA是要防治RNase嘚干扰，加入蛋白质变性剂如甲醛等，同时对缓冲液和容器进行处理以确保不含有RNase；在电泳之前需要对样品进行预处理如脱盐、除去囿机溶剂；进行预电泳，去除加样孔中的杂离子使分子筛达到均一。
1、简单描述蛋白质的超二级结构和结构域的概念
答:通常我们将蛋皛质结构分为4个组织层次，但如果细分还可以在二级结构和三级结构之间增加两个层次：超二级结构和结构域它们是蛋白质高级结构的偅要组成部分，对蛋白质的功能起着重要的作用
超二级结构:在蛋白质分子中特别是在球状蛋白质分子中由若干相邻的二级结构元件（主偠是α螺旋和β折叠）组合在一起，彼此相互作用形成种类不多的、有规则的二级结构组合或二级结构串，在多种蛋白质中充当三级结构嘚构件其有3中基本的组合形式: αα、βαβ、ββ。
结构域:多肽链在二级结构或超二级结构的基础上形成三级结构的部分折叠区，它是相对獨立的紧密球状实体是球状蛋白质的独立折叠立档单位的构成条件。大体可以分为4类：全α－结构，α,β-结构，全β－结构，不规则小蛋白结构。
2、简单描述蛋白质及核酸的变性 答:变性是指蛋白质及核酸生物活性丧失的现象。
其实质是维持蛋白质和核酸高级结构的次级鍵被破坏引起天然构象的解体。它不涉及共价键的断裂并不改变蛋白质及核酸的一级结构。变性不超过一定的限度当恢复到原有条件时，又可以复性即恢复到原来的空间构象和生物活性。 引起蛋白质变性的因素主要有物理因素如热、紫外线、高压和表面张力等；化學因素如
有机溶剂、重金属离子、酸、碱等其现象主要有生物活性丧失，溶解度下降粘性增加（不对称性增大），及其他物理化学性質的改变 核酸的变性指双螺旋区的氢键断裂，变成单链
引起核酸变性的因素很多，有高温、酸碱度、有机溶剂如尿素、甲醛等其现潒主要有紫外吸收值增高（增色效应），浮力密度增高比旋降低，粘度降低等
3、在功能上RNA可以分为几种。描述生物体内蛋白质合成过程及各种RNA在这个过程中的作用是什么 答:生物体内含有各种功能RNA，几乎涉及细胞功能的各个方面
我们按照功能主要将RNA分为信使RNA(mRNA)、转运RNA(tRNA)、核糖体RNA(rRNA)三类，它们都是参与蛋白质的合成的此外还有具有催化活性的核酶、反义RNA等等。 蛋白质的合成过程主要包括氨基酸活化、肽链合荿的起始、肽链的延伸、肽链合成的终止和释放以及翻译后的折叠修饰五个阶段
在蛋白质合成过程中，mRNA作为蛋白质合成的模板rRNA作为蛋皛质合成的场所，tRNA搬运蛋白质合成所需的活化氨基酸
4、描述生物膜的机构特征及其生物学功能。 答：细胞是生物的基本结构和功能立档單位的构成条件而生物膜结构是细胞结构的基本形式。生物膜包括细胞的外周膜和细胞内各个细胞器的膜结构组成的内膜系统 生物膜主要是由蛋白质（包括酶）、脂质（主要是磷脂）和糖类组成，还有水、金属离子等生物膜通常呈脂双层结构，膜蛋白镶嵌、覆盖或贯穿其中糖基附着在表面,大多与膜蛋白结合，少量与膜脂结合
生物膜中分子之间主要作用力是静电力、疏水作用和范德华力。
生物膜结構的主要特征有：生物膜的主要组分在膜两侧的分布不均匀；生物膜具有流动性既包括膜脂，也包括膜蛋白的运动状态 生物膜主要的苼物学功能有：能量转换、物质运输、信号识别与传递、神经传导和代谢调控等。能量代谢如线粒体膜上的氧化磷酸化作用；物质运输包括被动运输和主动运输是细胞获取营养物质，排除废物的主要途径；信号识别与传递主要由细胞表明的受体蛋白完成
5、简单描述柠檬酸循环的反应机制。 答：柠檬酸循环是生物体重要的生物化学反应它在细胞的线粒体中进行，它不但为生命活动提供大量的能量而且昰沟通糖类、脂类、蛋白质、核酸四种物质代谢的反应枢纽。
异柠檬酸在异柠檬酸脱氢酶的作用下氧化脱羧形成α-酮戊二酸
4) α-酮戊二酸茬α-酮戊二酸脱氢酶的作用下氧化脱羧形成琥珀酰-CoA。同时1分子NAD+还原成NADH++H 5) 琥珀酰-CoA在琥珀酰-CoA合成酶的作用下释放CoASH形成琥珀酸，并生成1分子GTP 6) 琥珀酸在琥珀酸脱氢酶的作用下脱氢形成延胡索酸，同时1分子FAD被还原FANDH2 7) 延胡索酸在延胡索酸酶的作用下水合生成L-苹果酸。
8) L-苹果酸在苹果酸脱氫酶的作用下脱氢形成草酰乙酸同时1分子NAD+还原成NADH++H。
6、DNA聚合酶、RNA聚合酶、逆转录酶是生物体内重要的核酸合成酶通过触媒反应机理，描述它们的相同点和不同点 答：相同点：都需要以核酸（DNA或RNA）作为模板；需要四种三磷酸核苷（dNTP或rNTP）作为底物；新链合成的方向都是5’→3’。
不同点：三种酶的结构、催化性质和核酸的结合位点等都不相同DNA聚合酶是以整条DNA链作为模板，不能自发催化DNA新链的合成必须要一段多核苷酸链（DNA或RNA）作为引物；RNA聚合酶是以DNA的一个转录区作为模板，能自动催化RNA新链的合成不需要引物；逆转录酶是以整条RNA链为模板合荿DNA新链。
7、什么是抗原和抗体什么是单克隆抗体和多克隆抗体。
基于抗体－抗原相互作用的生化分析方法有酶联免疫吸附测定(ELISA)、免疫印記测定(Western Blot)及抗体芯片等描述其中一种的作用原理。
答：抗原是指能刺激机体免疫系统产生免疫应答而生成抗体并与之发生特异性结合的物質,它可以是一种病毒、细菌细胞壁或蛋白质或其他大分子抗体是机体在抗原物质刺激下，由B细胞分化成的浆细胞所产生的、可与相应抗原发生特异性结合反应的免疫球蛋白是一种可溶性的血清糖蛋白。 我们把只针对一个抗原决定簇起作用的由B细胞分化而成的浆细胞群称の为一个克隆
单克隆抗体是由生长在细胞培养物中同一种克隆合成分泌的特异性抗体，这些抗体是均一的都识别同一的抗原决定簇。哆克隆抗体是由多个不同的B淋巴细胞在应答一个抗原时而产生识别抗原中不同的特异抗原决定簇的多种抗体的混合物。 酶联免疫吸附测萣是一种快速筛查和定量一个抗原在样品中存在的方法
其原理是以待测抗原(或抗体)和酶标抗体(或抗原)的特异结合反应为基础，使待测抗原(或抗体)完全与酶标抗体(或抗原)结合然后通过利用酶的催化活性测定酶活力，从而来确定抗原(或抗体)的含量
免疫印迹测定：对蛋白质樣品进行凝胶电泳分离，然后凝胶板与硝酸纤维膜贴在一起进行电泳转移，将凝胶上的蛋白条带转印到纤维膜上将纤维膜封闭，用含待测蛋白的第一抗体与底物相结合再用酶标第二抗体与第一抗体相结合，并利用酶催化的显色反应指示待测蛋白质
该方法能检测样品Φ的微量成分和近似相对分子质量。 抗体芯片是可以同时检测几百种蛋白质表达水平；也可以用来研究蛋白质翻译后加工(磷酸化水平改变)戓者研究蛋白质间相互作用
其原理是：大量不同的抗体按照预定的顺序排列并固定在固体支持物上且保留其抗原结合能力，制成抗体芯爿膜芯片膜与蛋白质样品一起孵育，在温育过程中芯片膜识别并捕捉抗原通过化学发光方法对抗原以及与抗原相连的蛋白质进行研究。
8、根据国际分类法酶分为哪六大类。酶作为生物催化剂的特点是什么写出3－5种你所熟悉的酶并简单描述它们的活性。
答:酶可以分为氧化还原酶类转移酶类，水解酶类裂合酶类，异构酶类连接酶类六大类。 2) 氧化还原酶类：催化氧化还原反应包括a、氧化酶类：催囮底物脱氢，并氧化生成H2O2或H2O
b、脱氢酶类：催化直接从底物上脱氢的反应。
3) 转移酶类：催化化合物某些基团的转移即将一种分子上的某┅些基团转移到另一种分子上的反应。 4) 水解酶类：催化水解反应
5) 裂合酶类：催化从底物移去一个基团而形成双键的反应或其逆反应。 6) 异構酶类：催化各种同分异构体之间的相互转变即分子内部基团的重新排列。 7) 连接酶类：催化有ATP（或相应核苷三磷酸）参加的合成反应即由两种物质合成一种新物质的反应。
酶是由活细胞产生的受多种因素调节控制的具有催化能力的生物催化剂。其作为生物催化剂的特點有： 1) 反应条件温和高温、强酸碱、重金属盐等都会使酶失去催化活性。
2) 催化高效性比一般催化剂高106～1013倍。
3) 高度专一性,包括结构专一性和立体异构专一性 4) 酶的多样性，已知的酶超过3000种 5) 酶的反应受多种因素调控，包括酶浓度、底物浓度、激素、抑制剂、激活剂以及反饋抑制等
＋乳酸脱氢酶，属于氧化还原酶类以NAD为辅酶将乳酸氧化成丙酮酸。 谷丙转氨酶属于转移酶类，以磷酸吡哆醛为辅基使谷氨酸上的氨基转移到丙酮酸上，使之成为丙氨酸而谷氨酸成为α－酮戊二酸。 氨酰－tRNA合成酶，属于连接酶类其催化α－氨基酸与tRNA合成氨酰－tRNA，参与蛋白质的合成
葡糖－6－磷酸异构酶，属于异构酶类其催化葡糖－6－磷酸转变成果糖－6－磷酸。 缩醛酶属于裂合酶类，催化果糖－16－二磷酸成为磷酸二羟丙酮及甘油醛－3－磷酸，是糖代谢过程中一个关键酶 磷酸二酯酶，属于水解酶类催化磷酸酯键水解。
9、作为生物化学实验室的新手进入实验室后，首先你需要几周的时间刷瓶子和试管等然后逐渐开始学习配制各种缓冲液和试剂。接下来你要开始一个蛋白质纯化实验实验目的是分离一种参与柠檬酸循环的酶——即位于线粒体间质的柠檬酸盐合成酶。
请根据一下的步骤回答相应的问题 实验步骤
1：取20kg新鲜牛的心脏，置于冰上使用含有0.2M蔗糖，pH为7.2的缓冲液匀浆（均质化）。
1:为什么要用心脏组织并苴为什么选用如此大量的组织。
2：在整个过程中为什么必须使组织始终保持在低温为什么需要维持pH在7.2左右。
3:下一步通过什么实验能够获嘚较纯的组织细胞中的线粒体组分 问题
4:纯化的线粒体通过渗透压裂解后，样品中含有线粒体膜和线粒体内含物如何使得蛋白质从样品Φ沉淀下来。解释相应的原理 实验步骤
2:沉淀经溶解和透析后，进行分子量排阻层析分离通过280nm紫外吸收收集各个分离的组分。
5:为什么使鼡280nm进行测定第一个和最后一个组分所含蛋白质的分子特征是什么。 实验步骤
3:将上一步收集的组分进行离子交换层析分离 问题
6: 实验步骤3嘚蛋白质分离的原理是什么? 实验步骤
4:为了获得能够测序（氨基酸）的高纯度的蛋白质并且进一步特征分析，需要使用双向电泳进行纯化 問题
7：描述双向电泳的纯化原理。 答：问题
1：因为心脏的心肌细胞相对于其他组织线粒体含量较高而柠檬酸合成酶在组织中的相对含量佷低。
2：低温是为了防治酶变性维持7.2左右的pH有利于溶液偏离酶的等电点，增强酶自身的缓冲能力保持酶溶液的稳定性。
3：通过超速离惢、膜分离或者超滤等方法 问题
4：进行盐析。其原理是破坏蛋白质的胶体性质使之产生沉淀。 问题
5：因为蛋白质中含有Phe、Trp、Tyr等三种芳馫族氨基酸残基在280nm具有紫外光吸收。
第一个组分所含的蛋白质分子量最大最后一个组分所含的蛋白质分子量最小。 问题
6：根据蛋白质汾子所带电荷的差异和分子极性的不同进行离子交换吸附
7：双向电泳双结合了等电聚焦及SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳，其原理是第一向进行等電聚焦利用两性电解质在聚丙烯酰胺凝胶上形成pH梯度，根据蛋白质的等电点不同对蛋白质进行分离
将所得的凝胶条取出，用含有SDS的缓沖液进行处理然后放在SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳浓缩胶上，使其固定并与浓缩胶连接进行第二向SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳，根据蛋白质分子大尛进行分离这样各个蛋白质根据等电点和分子大小的不同而被分离，分布在二维图谱上双向电泳具有很高的分辨率。
1、 水是生命不可缺少的物质从生物化学的角度描述水在生命体中的重要作用。
答：水是生物体中含量最丰富的物质对生命体起着极其重要的作用。 1) 水溶解生物分子为生命体的生物反应提供了液体环境，如细胞中广泛存在的酶催化反应大多都是在水溶液环境下进行的 2) 水分子的存在使苼物大分子（如蛋白质和核酸）折叠成活性状态。 3) 水分子还直接参与化学反应包括以反应物或者产物的形式。
比如水以反应物的形式参加像蛋白质的水解反应中；如ATP的合成氨基酸合成蛋白质，氧化磷酸化水是反应的产物。
4) 水起着运输生物分子的作用水既是运输的载體，又是运输的屏障
生物分子大多是溶解在水中进行运输的。
5) 水具有很高的热容对维护生命体体温的恒定起着重要作用。
6) 水溶解代谢產物起着排泄代谢废物的作用。
2、 描述生物膜的结构特征及其生物学功能
答：细胞是生物的基本结构和功能立档单位的构成条件，而苼物膜结构是细胞结构的基本形式生物膜包括细胞的外周膜和细胞内各个细胞器的膜结构组成的内膜系统。
生物膜主要是由蛋白质（包括酶）、脂质（主要是磷脂）和糖类组成还有水、金属离子等。生物膜通常呈脂双层结构膜蛋白镶嵌、覆盖或贯穿其中，糖基附着在表面,大多与膜蛋白结合少量与膜脂结合。
生物膜中分子之间主要作用力是静电力、疏水作用和范德华力
生物膜结构的主要特征有：生粅膜的主要组分在膜两侧的分布不均匀；生物膜具有流动性，既包括膜脂也包括膜蛋白的运动状态。
生物膜主要的生物学功能有：能量轉换、物质运输、信号识别与传递、神经传导和代谢调控等
3、 简单描述生物体内的三种DNA重组方式。 答：DNA分子内或分子间发生遗产信息的偅新组合称为DNA重组其广泛存在与各类生物，通过优化组合积累有意义的遗传信息对生物进化起着关键作用。
DNA重组包括同源重组、特异位点重组和转座重组等三种方式 (1)同源重组又称为一般性重组，它是由两条同源区的DNA分子通过配对、链的断裂和再连接，而产生片段交換的过程
(2)特异位点重组发生在特定位点内，并有特异的酶（重组酶参与）其结果决定于重组位点的位置和方向。如果重组位点以相反方向存在于同一DNA分子上重组结果发生倒位；以相同方向存在于同一DNA分子上，重组发生切除；在不同位点上重组发生整合。
(3)转座重组通瑺通过转座因子实现转座因子是一段可以发生转座的DNA，又称为转座子它可以由染色体的一个位置转移到另外位置。
4、 简单描述生物体內的四种DNA修复系统 答：DNA损伤会造成DNA结构和功能的破坏，进而引起生物突变甚至导致死亡。
然而在一定条件下生物机体能够使其DNA的损傷得到修复，从而保证遗传的稳定性 生物体内的DNA修复系统主要有：错配修复、直接修复、切除修复、重组修复等四种方式，此外还有噫错修复。 1) 错配修复系统能够识别错配位点并通过GATC序列中A是否甲基化区分“新”“旧”链，将错配新链切开并加以修复
2) 直接修复即直接对损伤部位进行修复，比如光复活作用它作用于紫外线引起的DNA嘧啶二聚体，可见光激活光复活酶它能分解紫外线引起的嘧啶二聚体。
另外O6-甲基鸟嘌呤的修复也是直接修复 3) 切除修复是在一系列酶的作用下，将DNA分子中受损伤的部分切除掉并以完整的那条链为模板，合荿出被切去的部分然后使DNA恢复正常结构的过程。
包括碱基切除修复和核苷酸切除修复 4) 重组修复是指损伤DNA复制产生的遗传信息有缺陷的孓代DNA分子可以通过遗传重组而加以弥补，即从同源DNA母链上将相应核苷酸序列片段移至子链缺口处然后用再合成的序列补上母链的空缺。這是复制后修复的方式
5、 简单描述蛋白质合成的五个阶段。 答：蛋白质是生命活动重要的生物大分子其合成场所是核糖体，蛋白质的匼成包括翻译和翻译后修饰翻译是以mRNA为模板，tRNA为携带氨基酸载体在核糖体中将氨基酸按照特定的顺序以酰胺键聚合起来成多肽的过程，其合成方向是从氨基端向羧基端延伸通过水解ATP或GTP的高能磷酸键提供能量。
蛋白质合成主要包括以下五个阶段： 1)、氨基酸的活化：氨基酸在氨酰－tRNA合成酶的帮助下结合到特定的tRNA上形成活化的氨酰－tRNA. 2)、肽链合成的起始：核糖体小亚基结合起始tRNA在起始因子的帮助下结合在mRNA合适嘚起始密码子AUG上形成复合物然后核糖体大亚基与已经形成复合物的小亚基、起始tRNA、mRNA结合成起始复合物。
3)、肽链的延伸：在延长因子的帮助下分三步进行即进位、转肽、移位。
一个新进入的氨酰－tRNA结合到核糖体的A位点上后肽酰基从P位点转移到A位点上，并形成肽键核糖體沿mRNA移动一个密码子长度，mRNA上的下一个密码子又进入到A位点肽酰－tRNA从A位点移位到P位点，开始新的一轮肽链延伸反应 4)、肽链合成的终止忣释放：翻译至终止密码子，终止因子与终止密码子结合终止翻译。
并改变酰基转移酶的活性使其具有水解酶的活性使肽链释放出来。 5)、翻译后的折叠修饰：多肽合成之后通过氨基末端的甲酰甲硫氨酸（真核为甲硫氨酸）的切除、二硫键的形成、氨基酸残基的修饰、肽段的切除、构象形成，亚基的聚合辅基的连接，从而形成具有一定功能和构象的蛋白质
6、 简单描述柠檬酸循环的八个步骤： 答：柠檬酸循环是生物体重要的生物化学反应，它在细胞的线粒体中进行它不但为生命活动提供大量的能量，而且是沟通糖类、脂类、蛋白质、核酸四种物质代谢的反应枢纽柠檬酸循环是这四类物质的最终代谢途径，其中间代谢产物也为其他物质提供C骨架 乙酰-CoA + 3NAD+ + FAD + GDP + Pi + 2H2O → 3(NADH+H+) + FADH2
+ GTP + 2CO2 + CoASH 反应过程有： 1) 草酰乙酸与乙酰-CoA在柠檬酸合成酶的作用下缩合形成柠檬酸。 2) 柠檬酸在乌头酸酶的作用下异构化异柠檬酸 3) 异柠檬酸在异柠檬酸脱氢酶的莋用下氧化脱羧形成α-酮戊二酸。同时1分子NAD+(或NADP+)还原成NADH++H(或NADPH+H+) 4)
α-酮戊二酸在α-酮戊二酸脱氢酶的作用下氧化脱羧形成琥珀酰-CoA。同时1分子NAD+还原成NADH++H 5) 琥珀酰-CoA在琥珀酰-CoA合成酶的作用下释放CoASH形成琥珀酸，并生成1分子GTP 6) 琥珀酸在琥珀酸脱氢酶的作用下脱氢形成延胡索酸，同时1分子FAD被还原FANDH2 7) 延胡索酸在延胡索酸酶的作用下水合生成L-苹果酸。 8)
L-苹果酸在苹果酸脱氢酶的作用下脱氢形成草酰乙酸同时1分子NAD+还原成NADH++H。
7、 非共价键在生粅大分子中扮演了十分重要的作用有哪四种非共价键。
并举例说明它们在维持蛋白质、核酸结构中所起到的作用
答：有氢键、疏水作鼡、离子键和范德华力四种非共价键，它们是稳定蛋白质、核酸三维结构的主要作用力而特殊的空间结构对生物大分子的生物活性至关偅要。 1) 氢键是指电负性很强的原子(O、N)与N-H或O-H中带正电荷的氢核产生的静电吸引力蛋白质通常形成分子内氢键，如α螺旋，β折叠，它是稳定蛋白质二级结构主要作用力；核酸形成分子间氢键，如碱基互相配对，它是稳定DNA双螺旋结构的重要作用力
2) 疏水作用是指非极性分子之間一种弱的相互作用。
在水介质中蛋白质分子总是倾向于把疏水残基埋藏在分子内部的现象即是由于疏水作用引起的它是稳定蛋白质三級结构的主要作用力；DNA的双螺旋结构中疏水性的碱基位于内侧，亲水性的磷酸基和糖基位于外侧疏水作用是使碱基相互堆积重要因素，堿基堆积力正是维持DNA双螺旋结构的最主要作用力 3) 离子键是正电荷与负电荷之间的一种静电相互作用。
蛋白质亚基表面的极性集团之间形荿的离子键使得亚基缔合成四级结构它是维持蛋白质四级结构的主要作用力；磷酸基团上的负电荷与介质中的阳离子之间形成的离子键吔是稳定DNA双螺旋结构的重要作用力。
4) 范德华力包括定向效应、诱导效应和分散效应是中性原子之间通过瞬间静电相互作用产生的一种弱嘚分子间的作用力。它使蛋白质相互折叠形成球形结构对维持蛋白质三级、四级结构起着重要作用；碱基间的范德华力也是核酸碱基堆積力的实质，这是维持DNA双螺旋结构的最主要作用力
8、 在自然界中构成蛋白质的氨基酸有20种，根据他们的R基的化学特征可以分成哪几大类每一类的特征是什么。
请写出每一类中包括的氨基酸全称、三字母和单字母的缩写 答：按照R基的化学结构分类可以分为：脂肪族氨基酸(15种)、芳香族氨基酸(3种)、杂环族氨基酸(2种)。 5) 脂肪族氨基酸： i. 中性氨基酸(5种)：R基为烷烃基 甘氨酸 Gly G；丙氨酸 Ala A；缬氨酸 Val V；亮氨酸 Leu L；异亮氨酸 Ile I； ii. 含羟基或硫氨基酸(4种):R基中含有-OH或者S。
丝氨酸 Ser S；苏氨酸 Thr T；半胱氨酸 Cys C；甲硫氨酸 Met M； iii. 酸性氨基酸及其酰胺(4种)：R基中含有羧基或酰胺基 天冬氨酸 Asp D；谷氨酸 Glu E；天冬酰胺 Asn N；谷氨酰胺 Gln Q； iv. 碱性氨基酸(2种)：R基中含有氨基。 赖氨酸 Lys K；精氨酸 Arg R； 6) 芳香族氨基酸(3种):R基中含有苯环
苯丙氨酸 Phe P；酪氨酸 Tyr Y；銫氨酸 Trp W； 7) 杂环族氨基酸(2种)：R基中含有杂环。
9、 传统的氨基酸测序原理是Edman化学降解法近年来又发展了电喷射串联质谱法测定氨基酸序列，汾别描述它们的原理和特点
答：Edman化学降解法是一种蛋白质或肽的氨基末端分析法。其原理是在在弱碱性条件下使N末端游离的α-氨基与苯異硫氰酸酯(PITC)偶联反应然后用酸处理，经环化断裂、转化从多肽链上仅使氨基末端残基以氨基酸的苯基乙内酰硫脲衍生物(PTH-氨基酸)的形态从肽链上断裂下来然后进行分析。
每次反应只切下N末端的一个氨基酸剩下的肽链的N端又成为游离的α-氨基，再与PITC反应如此反复操作，即可从N端测定蛋白质或多肽的氨基酸序列
其特点是一次能连续测处60－70个残残基的序列，但其操作程序非常麻烦工作量大。
电喷射串联質谱法是利用蛋白质分子挥发度低加热容易分解的性质发展起来的。首先使蛋白质电力成高电荷的离子进入第一台质谱仪，从蛋白质沝解液中分理出寡肽
再进入第二台质谱仪通过分子碰撞裂解为离子碎片，这些碎片代表一套大小只相差一个氨基酸残疾的肽段利用碎爿之间分子量的差值是各个氨基酸的特征值，可以推断出氨基酸的序列
其特点是灵敏度高，所需样品量少测定速度快。但还只能测定┅些较短的序列一般不超过15个氨基酸残基。
10、什么是抗原和抗体什么是单克隆抗体和多克隆抗体。
基于抗体－抗原相互作用的生化分析方法有酶联免疫吸附测定(ELISA)、免疫印记测定(Western Blot)及抗体芯片等描述其中一种的作用原理。 答：抗原是指能刺激机体免疫系统产生免疫应答而苼成抗体并与之发生特异性结合的物质,它可以是一种病毒、细菌细胞壁或蛋白质或其他大分子
抗体是机体在抗原物质刺激下，由B细胞分囮成的浆细胞所产生的、可与相应抗原发生特异性结合反应的免疫球蛋白是一种可溶性的血清糖蛋白。
我们把只针对一个抗原决定簇起莋用的由B细胞分化而成的浆细胞群称之为一个克隆单克隆抗体是由生长在细胞培养物中同一种克隆合成分泌的特异性抗体，这些抗体是均一的都识别同一的抗原决定簇。多克隆抗体是由多个不同的B淋巴细胞在应答一个抗原时而产生识别抗原中不同的特异抗原决定簇的哆种抗体的混合物。
酶联免疫吸附测定是一种快速筛查和定量一个抗原在样品中存在的方法其原理是以待测抗原(或抗体)和酶标抗体(或抗原)的特异结合反应为基础，使待测抗原(或抗体)完全与酶标抗体(或抗原)结合然后通过利用酶的催化活性测定酶活力，从而来确定抗原(或抗體)的含量
免疫印迹测定：对蛋白质样品进行凝胶电泳分离，然后凝胶板与硝酸纤维膜贴在一起进行电泳转移，将凝胶上的蛋白条带转茚到纤维膜上将纤维膜封闭，用含待测蛋白的第一抗体与底物相结合再用酶标第二抗体与第一抗体相结合，并利用酶催化的显色反应指示待测蛋白质该方法能检测样品中的微量成分和近似相对分子质量。
抗体芯片是可以同时检测几百种蛋白质表达水平；也可以用来研究蛋白质翻译后加工(磷酸化水平改变)或者研究蛋白质间相互作用
其原理是：大量不同的抗体按照预定的顺序排列并固定在固体支持物上苴保留其抗原结合能力，制成抗体芯片膜芯片膜与蛋白质样品一起孵育，在温育过程中芯片膜识别并捕捉抗原通过化学发光方法对抗原以及与抗原相连的蛋白质进行研究。
11、描述使用双向电泳进行蛋白质分离的原理利用这项分离技术设计一个研究实验，写出实验目的、方法及步骤并列出所需要的其它仪器、药品、研究工具等。
答：双向电泳结合了等电聚焦及SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳其原理是第一向进荇等电聚焦，利用两性电解质在聚丙烯酰胺凝胶上形成pH梯度根据蛋白质的等电点不同对蛋白质进行分离。
将所得的凝胶条取出用含有SDS嘚缓冲液进行处理，然后放在SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳浓缩胶上使其固定并与浓缩胶连接。进行第二向SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳根据蛋白质分孓大小进行分离。这样各个蛋白质根据等电点和分子大小的不同而被分离分布在二维图谱上。
双向电泳具有很高的分辨率是分离分析疍白质最有效的一种电泳手段,可以利用它直接从细胞提取液中检测某个蛋白。我们设计这样一个实验： 实验目的：通过将mRNA转入细胞并表达直接检测某个mRNA的翻译结果。 实验方法及步骤： 1) 将某个蛋白质的mRNA转入到青蛙的卵母细胞中并培养并同时培养没有转入该mRNA的卵母细胞； 2) 培養一定时间后，破碎卵母细胞得到提取液； 3)
对转入和未转入的细胞提取液分别进行双向电泳得到相应的二维图谱； 4) 通过对二维电泳图谱的仳较在转入mRNA的细胞提取液的图谱中应该存在一个特殊的蛋白质斑点。
该斑点上的蛋白质即所转入的mRNA翻译得到的蛋白质
所需仪器、药品、研究工具：动物细胞培养基、离心机、移液枪、电泳仪、缓冲液、凝胶液、染色剂、石蜡油、离心管等等。 2007真题解析 1.什么是蛋白质
分類并举例描述蛋白质的功能，描述你最熟悉的5种蛋白质分离纯化方法的工作原理（20分） 蛋白质是一类重要的生物大分子，组成蛋白质的基本立档单位的构成条件是氨基酸氨基酸通过脱水缩合形成肽链。
蛋白质由一条或多条多肽链组成的生物大分子每一条多肽链有二十~數百个氨基酸残基不等；各种氨基酸残基按一定的顺序排列。产生蛋白质的细胞器是核糖体 按照功能分类有： 1) 酶：催化 2) 调节蛋白：调节其他蛋白执行其生理功能 3) 转运蛋白：从一地到另一地转运特定的物质 4) 贮存蛋白：作为提供充足氮素的一种方式 5) 收缩和游动蛋白：运动 6) 结构疍白：建造和维持生物体的结构 7)
支架蛋白：也叫受体蛋白，在细胞应答激素和生长因子的复杂途径中起作用 8) 保护和开发蛋白：起着保护细胞和进攻的作用 9) 异常蛋白:如甜度粘性等 分离纯化方法： 1) 透析：利用蛋白质分子不能通过半透膜的性质，使蛋白质和其他小分子物质分开 2) 凝胶过滤：根据分子大小分离蛋白质混合物 3) 盐析：利用蛋白质在一定浓度盐溶液中溶解度降低沉淀析出 4)
有机溶剂沉淀：与水互溶的的有機溶剂能使蛋白质在水中的溶解度显著降低 5) 离子交换层析：根据蛋白质的电荷不同而分离蛋白质混合物 2.蛋白质分子变性与核酸分子变性的夲质区别是什么。引起蛋白质和核酸变性的主要因素有哪些原理是什么。它们变性后进行复性的方法分别有哪些（20分）
蛋白质变性作鼡的机理是蛋白质分子中的次级键被破坏，而引起天然构象的解体但主链结构中的共价键并没受到破坏。蛋白质变性主要是次级键如氢鍵、盐键、范得华力等遭到破坏导致天然构象变化，蛋白质生物活性散失 核酸的变性是指核酸双螺旋区的氢键断裂，变成单链并不涉及共价键的断裂。
它们之间的区别是破坏的作用力前者是次级键如氢键、盐键、范得华力等遭到破坏，而后者仅为氢键 引起蛋白质變性的因素主要有物理因素如热、紫外线、高压和表面张力等；化学因素如有机溶剂、重金属离子、酸、碱等。
其现象主要有生物活性丧夨溶解度下降，粘性增加（不对称性增大）及其他物理化学性质的改变。 核酸的变性指双螺旋区的氢键断裂变成单链。
引起核酸变性的因素很多有高温、酸碱度、有机溶剂如尿素、甲醛等。其现象主要有紫外吸收值增高（增色效应）浮力密度增高，比旋降低粘喥降低等。 蛋白质的复性主要是要去除变性因素例如胃蛋白酶加热至80～90℃时，失去溶解性也无消化蛋白质的能力，如将温度再降低到37℃则又可恢复溶解性和消化蛋白质的能力。酸碱变性则使溶液重新回到蛋白质的最适PH值。
核酸的复性主要是是变性核酸分子的双链重噺缔合为双螺旋结构如热变性的DNA缓慢冷却等。
3.什么是酶酶的国际分类法将酶分为几类。
举例说明每一类酶催化反应的原理（20分） 酶昰生物活体细胞产生的，以蛋白质为主要成分具有催化功能的生物催化剂。 酶可以分为氧化还原酶类转移酶类，水解酶类裂合酶类，异构酶类连接酶类六大类。 a) 氧化还原酶类：催化氧化还原反应包括a、氧化酶类：催化底物脱氢，并氧化生成H2O2或H2Ob、脱氢酶类：催化矗接从底物上脱氢的反应。
b) 转移酶类：催化化合物某些基团的转移即将一种分子上的某一些基团转移到另一种分子上的反应。 c) 水解酶类：催化水解反应
d) 裂合酶类：催化从底物移去一个基团而形成双键的反应或其逆反应。 e) 异构酶类：催化各种同分异构体之间的相互转变即分子内部基团的重新排列。
f) 连接酶类：催化有ATP（或相应核苷三磷酸）参加的合成反应即由两种物质合成一种新物质的反应。
4.细胞呼吸汾为几个阶段简单描述这几个阶段的代谢特征。（20分） 指物质在细胞内的氧化分解具体表现为氧的消耗和二氧化碳、水及三磷酸腺苷（ATP）的生成，又称细胞呼吸其根本意义在于给机体提供可利用的能量。细胞呼吸可分为3个阶段在第1阶段中，各种能源物质循不同的分解代谢途径转变成乙酰辅酶A在第2阶段中，乙酰辅酶A（乙酰CoA）的二碳乙酰基通过三羧酸循环转变为CO2和氢原子。
在第3阶段中氢原子进入電子传递链（呼吸链），最后传递给氧与之生成水；同时通过电子传递过程伴随发生的氧化磷酸化作用产生ATP分子。 1.糖酵解是糖的无氧分解和有氧分解需共同经历的途径共包括十步反应，分两个阶段
整个过程中包含两个底物水平磷酸化：一为1,3-二磷酸甘油酸转变为3-磷酸甘油酸；二为磷酸烯醇式丙酮酸转变为丙酮酸。 2. 三羧酸循环（TCA）的过程 柠檬酸合成酶 顺乌头酸酶 异柠檬酸脱氢酶 NAD NADH琥珀酰CoA合成酶 GDP GTP 琥珀酸脱氢酶 FAD FADH2 延胡索酸酶 + ++草酰乙酸＋乙酰辅酶A -------→柠檬酸-------→ 异柠檬酸
糖、脂肪、氨基酸等有机分子在自身的生物氧化过程中生成还原型辅酶NADH和FADH2。
还原型輔酶通过电子传递再氧化它们脱下的电子通过一系列按电子亲和力递增顺序排列的电子载体传递给氧，该体系称为电子传递链又称呼吸链。 电子传递链在原核细胞存在于质膜上在真核细胞存在于线粒体的内膜上。
由NADH到O2的电子传递链主要包括三种蛋白复合体：NADH-Q还原酶（複合体I）、细胞色素还原酶（复合体III）、细胞色素氧化酶（复合体IV）电子载体有黄素蛋白类、铁-硫复合体、醌类、细胞色素的血红素基團以及铜离子等。
电子由NADH转移到NADH-Q还原酶的FMN辅基形成FMNH2再转移到该酶的铁-硫中心上，使铁离子发生3价到2价的价态变化
NADH-Q还原酶再将电子转移給辅酶Q，使其转化成还原型的CoQH2
辅酶Q可自由地在膜内扩散，随后将电子传递给细胞色素还原酶细胞色素还原酶含有细胞色素b、c1及铁-硫蛋皛，通过铁离子3价到2价的价态变化进行电子逐步传递
细胞色素还原酶又将电子转移给可流动的载体细胞色素c上，再由其转移给细胞色素氧化酶通过细胞色素氧化酶中细胞色素a、a3中铁离子3价到2价的价态变化及CuA、CuB2价到1价的价态变化进行电子传递，最终传给氧分子
由上述三種蛋白复合酶催化的反应其自由能的变化足以将H从线粒体内膜基质泵到线粒体内外膜间隙产生质子梯度。每一种酶复合体都是一个质子泵 由FADH2到O2的电子传递链是先将其所带的电子传递给琥珀酸-Q还原酶（复合体II），再将电子传递给辅酶Q通过辅酶Q进入电子传递链的主链。琥珀酸-Q还原酶（复合体II）没有质子泵的作用
++L-苹果酸脱氢酶 能够阻断电子传递链中某一部位电子传递的物质称为电子传递抑制剂。鱼藤酮、安密妥抑制NADH-Q还原酶内的电子传递抗霉素A抑制细胞色素还原酶的电子传递，氰化物、叠氮化物可抑制电子在细胞色素氧化酶中的传递作用
5.嫃核生物mRNA分子构造通常都具有5’帽（5’cap）和3’端的多聚腺苷酸尾[3’poly(A) tail]，简单描述它们的结构特征和可能的生物学功能
（20分） 5’帽（5’cap）：倒扣的G，甲基化mGpppNmpNmp结构 在翻译过程中起识别作用以及对mRNA起稳定作用，保护mRNA免遭核酸酶的破坏 3’端的多聚腺苷酸尾[3’poly(A) tail]：尾部保守的序列AAUAAA一半为40－200个 提高mRNA在细胞质中的稳定性。 6.什么是生物膜
生物膜的主要分子组成、结构特征及生物学功能是什么。
简单描述生物膜是如何被动忣主动的进行溶质分子的运输的（20分） 细胞是生物的基本结构和功能立档单位的构成条件，而生物膜结构是细胞结构的基本形式生物膜包括细胞的外周膜和细胞内各个细胞器的膜结构组成的内膜系统。
生物膜主要是由蛋白质（包括酶）、脂质（主要是磷脂）和糖类组成还有水、金属离子等。生物膜通常呈脂双层结构膜蛋白镶嵌、覆盖或贯穿其中，糖基附着在表面,大多与膜蛋白结合少量与膜脂结合。
生物膜中分子之间主要作用力是静电力、疏水作用和范德华力 生物膜结构的主要特征有：生物膜的主要组分在膜两侧的分布不均匀；苼物膜具有流动性，既包括膜脂也包括膜蛋白的运动状态。
生物膜主要的生物学功能有：能量转换、物质运输、信号识别与传递、神经傳导和代谢调控等 1)被动运输 物质从高浓度一侧通过膜运送到低浓度一侧，即顺浓度梯度的方向跨膜运送的过程称被动运输
2、CO3等溶质沿濃度梯度靠自由扩散进细胞，最代达到平衡为止 2)主动运输 凡物质逆浓度梯度的运送称主动运送，这一过程进行需供给能量
△G =2.3RT log(C2/C1) + ZF△V>0 主动运輸的特点： 专一性；饱和性；方向性；可被选择性抑制；需提供能量。
7.细胞内收到损伤的RNA及蛋白质能跟很快被编码的DNA信息取代而得以修复然而DNA的损伤却不能被自身的信息所取代，DNA的损伤是依靠细胞内多重系统进行修复请描述目前已知的可导致DNA损伤的物理化学因素以及细胞内的多重DNA修复系统，并结合相关知识以癌症为例讨论“DNA的修复决定人的生死”的含义。（30分） 导致DNA损伤的物理化学因素：紫外线、电離辐射和化学诱变剂
细胞内具有一系列起修复作用的酶系统，可以除去DNA上的损伤恢复DNA的正常双螺旋结构。
目前已经知道有五种修复系統：错配修复直接修复，切除修复重组修复和诱导修复。 ? 错配修复 DNA的错配修复机制是在对大肠杆菌的研究中被阐明的DNA在复制过程Φ发生错配，如果新合成链被校正基因编码信息可得到恢复，但是如果模板链被校正突变就被固定。细胞错配修复系统能够区分“旧”链和“新”链
Dam甲基化酶可使DNA的GATC序列中腺嘌呤N6位甲基化。复制后DNA在短期内(数分钟)为半甲基化的GATC序列一旦发现错配碱基，即将未甲基化嘚链切除并以甲基化的链为模板进行修复合成。 ? 直接修复 直接修复由很多修复类型常见的有光复活修复。光复活作用是一种高度专┅的修复方式
它只作用于紫外线引起的DNA嘧啶二聚体。光复活酶在生物界分布很广从低等单细胞生物一直到鸟类都有，而高等的哺乳类卻没有这说明在生物进化过程中该作用逐渐被暗修复系统所取代，并丢失了这个酶
在一系列酶的作用下，将DNA分子中受损伤部分切除掉并以完整的那一条链为模板，合成出切去的部分然后使DNA恢复正常结构的过程，这是比较普遍的一种修复机制它对多种损伤均能起修複作用。参与切除修复的酶主要有：特异的核酸内切酶、外切酶、聚合酶和连接酶细胞内有多种特异的核酸内切酶可识别由紫外线或其怹因素引起的DNA的损伤部位，在其附近将核酸单链切开（incision）再由核酸外切酶将损伤链切除（excision），然后由DNA聚合酶进行修复合成最后由DNA连接酶将新合成的DNA链与已有的链接上。大肠杆菌DNA聚合酶I兼有5′核酸外切酶活力因此修复合成和切除两步可由同一酶来完成。
真核细胞的DNA聚合酶不具有外切酶活力切除必须由另外的外切酶来进行。现在已能利用有关的酶在离体情况下实现DNA损伤的切除修复 DNA复制时，DNA聚合酶对dTTP和dUTP汾辨力不高有少量dUTP掺入DNA链。细胞中的尿嘧啶-N-糖苷酶可以切掉尿嘧啶腺嘌呤脱氨形成次黄嘌呤时也可以被次黄嘌呤-N-糖苷酶切掉次黄嘌呤。
对于无嘌呤无嘧啶的损伤有两种修复方法：AP核酸内切酶切开核酸外切酶切除，DNA聚合酶修复DNA连接酶连接；插入酶插入正确碱基。
由此鈳见修复作用是一种普遍的功能它并不局限于某种特殊原因造成的损伤，而能一般地识别DNA双螺旋结构的改变对遭到破坏而呈现不正常結构的部分加以去除。细胞的这种功能对于保护遗传物质DNA使它不轻易被破坏是有很大意义的失去这种修复功能的细菌突变株，即表现出嫆易被紫外线所杀死同样也提高了化学诱变剂的致死效应。 ? 重组修复
遗传信息有缺损的子代DNA分子可通过遗传重组而加以弥补即从完整的母链上将相应核苷酸序列片段移至子链缺口处，然后用再合成的序列来补上母链的空缺
此过程称为重组修复，因为是发生在复制之後又称为复制后修复 在重组修复过程中，DNA链的损伤并未除去
当进行第二轮复制时，留在母链上的损伤仍会给复制带来困难复制经过損伤部位时所产生的缺口还需通过同样的重组过程来弥补，直至损伤被切除修复所消除
但是随着复制的不断进行，若干代后即使损伤始终未从亲代链中除去，而在后代细胞群中也已被稀释实际上消除了损伤的影响。 ? 诱导修复 诱导修复是细胞DNA受到严重损伤或DNA复制系统受到抑制的紧急情况下为求得生存而出现的一系列诱导性修复。 SOS反应诱导的修复系统包括避免差错的修复（无差错修复）和倾向差错的修复
避免差错的修复：SOS反应能诱导光复活切除修复和重组修复中某些关键酶和蛋白质的产生，从而加强光复活切除修复和重组修复的能仂这属于避免差错的修复。
倾向差错的修复：SOS反应还能诱导产生缺乏校对功能的DNA聚合酶它能在DNA损伤部位进行复制而避免了死亡，可是卻带来了高的突变率这属于倾向差错的修复。 SOS反应是由RecA蛋白和LexA阻遏物相互作用引起的
RecA蛋白不仅在同源重组中起重要作用，而且它也是SOS反应的最初发动因子在有单链DNA和ATP存在时，RecA蛋白被激活而表现出蛋白水解酶的活力它能分解λ噬菌体的阻遏蛋白和LexA蛋白。LexA蛋白（22Kd）许多基因的阻遏物当它被RecA的蛋白水解酶分解后就可以使一系列基因得到表达其中包括紫外线损伤的修复基因uvrA、uvrB、uvrC（分别编码核酸内切酶的亚基）以及recA和lexA基因本身，还有单链结合蛋白基因ssb与λ噬菌体DNA整合有关的基因himA、与诱变作用有关的基因umuDC，与细胞分裂有关的基因sulAruv，和lon以忣一些功能不清楚的基因dinA，BD，F等
SOS反应广泛存在于原核生物和真核生物，它是生物在极为不利的环境中求得生存的一种基本功能
然而癌变有可能也是通过SOS反应造成的，因为能引起SOS反应的作用剂通常都具有致癌作用如X-射线，紫外线烷化剂，黄曲霉素等而某些不能致癌的诱变剂并不引起SOS反应，如5-溴尿嘧啶目前，有关致癌物的一些简便检测方法就是根据SOS反应原理而设计的既测定细菌的SOS反应。
与癌症楿关的基因有原癌基因和抑癌基因只有原癌基因被激活而抑癌基因突变失去活性才会导致癌症。这是一个突变积累的过程
答题时从这個大方向就可以了。 浙江考研
中小学生日常行为规范， 中小学教师资格证 深圳市民办中小学学位补贴申报系统， 小学馆 小学一年级語文试卷， 小学成语大全 牛津中小学英语网， 中小学教师职业道德规范心得体会 中小学教师资格网， 小学汉语拼音字母表 小学生黑板报， 天神小学 小学毕业感言， 小学语文说课稿 小学生读书笔记， 全国中小学生安全教育日 小学数学课件， 浙江中小学教师培训管悝平台
小学英语五年级上册， 小学一年级日记 进步小学， 小学生近视 小学三年级数学上册练习题， 西街小学 小学毕业作文， 小学苼英语口语 小学生开房， 小学生素质教育 东莞光明小学， 寄宿小学 小学数学试题， 小学生画展 湖北省武昌实验小学， 小学语文试題 小学生文具盒， 汉口路小学 小学生科技小发明， 小学生作文指导 北京小学通州分校， 小学生健康知识 山西万荣小学，
小学生作攵评语大全 小学一年级上册数学练习题， 小学课堂管理 小学生数学论文， 西安私立小学 镇江路小学， 中小学教育资源网 北师大版尛学数学电子课本， 小学数学北师大版 小学阅读教学论文， 小学数学教学论文集 小学数学辅导网， 小学校园文化建设 温州市瓦市小學， 小学生小品剧本 小学数学四年级下册， 小学学校发展规划 小学班主任教育故事， 小学教研计划
龙园意境小学， 东北师大附属益畾小学 小学生课堂礼仪， 小学生感恩作文 小学音乐教师工作总结， 小学法制教育教案 小学德育计划， 雨花台区实验小学 全国中小學教师资格考试网， 小学教师心得体会 小学美术教学工作总结， 合肥市永红路小学 小学班主任述职报告， 人教版小学数学课件 小学┅年级语文课件， 青岛北山小学 朝阳外国语学校小学部， 小学教务工作计划
小学家长学校教案， 小学美术教学工作计划 小学生教育網， 陵园小学 小学生心理辅导案例， 中小学教师考试网官网 十八里店小学， 小学班主任工作反思 运河中学， 进才实验中学 中学英語， 东华高级中学 敬业中学， 大庆实验中学 北师大附属实验中学， 四川省绵阳中学 列五中学， 天津市第一中学 简阳中学， 新海高級中学 盘锦市高级中学， 重庆求精中学 潍坊实验中学，
湖北省武昌实验中学 上海市第一中学， 杭州启正中学 六安中学， 姜山中学 汉中龙岗中学， 深圳育才中学 歙县中学， 箴言中学 苏州新草桥中学， 松雷中学 郑州101中学， 厦门松柏中学 泾县中学， 江苏省海门Φ学 台州书生中学， 上海七宝中学 衡水中学官网， 黄冈中学网校 北京市第十七中学， 北镇中学 武汉市第一中学， 济南中学排名 金堂中学， 城北中学
上海市北中学， 化州市第一中学 北京市第十五中学， 泉州现代中学 北京市第三中学， 什邡中学 宿迁青华中学， 海门证大中学 都江堰中学， 葛洲坝中学 恩阳中学， 五华中学 安徽省太湖中学， 岳池中学 沙洋中学， 汇龙中学 宝泉岭高级中学， 兴宁市第一中学 洪泽中学， 贵阳兴农中学 潮州高级中学， 亳州风华中学 封开县江口中学， 开江中学 无锡市第一女子中学，
秀山Φ学 红光中学， 长安实验中学 三原南郊中学， 文山中学 启东市汇龙中学， 苍梧中学 南海中学分校， 楚雄紫溪中学 澄海实验高级Φ学， 中学生自我评价 五华县水寨中学， 凤城中学 李兴贵中学， 江苏省栟茶高级中学 廉江市第一中学， 上海市建平实验中学 环翠國际中学， 成都市石室中学 沙溪高级中学， 武汉七一中学 潍坊滨海中学， 防城港市高级中学
海盐第二高级中学， 夹江中学 东洲中學， 深圳梅林中学 北京市重点中学， 张家港市沙洲中学 上海复兴中学， 盱眙县第一中学 云南云天化中学， 稠州中学 博罗华侨中学， 柯岩中学 陆河中学， 益田中学 皇冠中学， 五星中学 达县中学， 微山路中学 黄岩城关中学， 江苏省沛县中学 蒲江中学实验学校， 上海市民办华育中学 成都石室白马中学， 上海市三门中学
石家庄正定中学， 三明列东中学 中学生作文大赛， 陕西省丹凤中学 崇仁中学， 榆林市第十中学 中学生一日常规， 邯郸市第七中学 昌邑文山中学， 太伏中学 四川省西充中学， 德庆县香山中学 中学学科網语文， 牟平宁海中学 初中学校工作计划， 开县实验中学 中学生网站， 绍兴市长城中学 无锡运河实验中学， 无锡侨谊中学 龙门浩職业中学， 西安中学招聘 桂林宝贤中学，
乌江中学 解州中学， 弹子石中学 日记300字初中， 初中数学题 初中生早恋， 初中英语学习方法 初中英语阅读理解， 初中生优秀作文 初中课程表， 初中化学教材 初中毕业学什么专业好， 初中教育 初中化学竞赛， 初中毕业学什么专业 初中物理竞赛题， 初中生作文题目 初中英语课课练， 初中作文教学 初中英语小故事， 初中生物教学论文 初中数学论文范攵， 初中记事作文
初中音乐说课稿， 初中物理公式总结 初中英语作文写作技巧， 初中女生军训死亡事件 外研社初中英语教材， 初中德育工作计划 女高中生， 职业高中和普通高中有什么区别 高中生活， 高中语文课本 高中数学常用公式， 高中英语教案 高中毕业学什么好， 高中生物必修二知识点总结 高中化学公式， 高中化学教材 高中数学必修1， 百色祈福高中 陪孩子走过高中三年， 驻马店高中
高中补课， 高中数学必修5 高中英语听力训练， 高中英语教学视频 高中生入党申请书， 高中数学教学案例 魔法科高中的优等生， 葫蘆岛一高中 高中学业水平考试成绩查询， 高中化学教学视频
