apc和pe-cy5双染是不是冲突了

在正常细胞中磷脂酰丝氨酸(PS)只分布在细胞膜脂质双层的内侧,而在细胞凋亡早期细胞膜中的磷脂酰丝氨酸(PS)由脂膜内侧翻向外侧。Annexin V 是一种分子量为35~36kD 的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白与磷脂酰丝氨酸有高度亲和力,故可通过细胞外侧暴露的磷脂酰丝氨酸与凋亡早期细胞的胞膜结合因此Annexin V 被作为检测细胞早期凋亡的灵敏指标之一。将Annexin V 进行荧光素 标记以标记了的Annexin V 作为荧光探针,利用荧光显微镜或流式细胞仪可检测细胞凋亡的发生

碘化丙啶(Propidium Iodide, PI)是一种核酸染料,它不能透过完整的细胞膜但对凋亡中晚期的细胞和死细胞,PI 能够透过细胞膜而使细胞核染红因此将Annexin V- 与PI 匹配使用,就可以将处于不同凋亡时期的细胞区分开来

本试剂盒可应用于培养细胞凋亡检测(不推荐用于检测组织样本)。

1. 微量试剂取用前请离惢集液

3. PI 为潜在致癌物,操作时请采取防护措施穿防护服、戴手套等。

4. 本试剂盒适用于检测活细胞流式细胞仪检测时,细胞数量不以應低于1×105,不推荐用于检测组织样本

5. 推荐使用悬浮培养细胞。如果是贴壁细胞建议适用不含EDTA 的胰酶消化,如消化不当可能引起假陽性,而用细胞刮子会造成细胞粘连成团而影响检测。可将胰酶消化后细胞的保存在含2%BSA 的PBS 中防止进一步的损伤。

6. 细胞固定后可能导致熒光的淬灭请不要固定样品。

7. 因检测细胞的类型、凋亡诱导剂种类、使用的检测仪器不同因而流式检测的荧光补偿也不同,因此建议烸次检测均需使用未经凋亡诱导处理的细胞作为对照进行荧光补偿的调节。


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