汇总资料cho细胞蛋白表达系统_百度文库
两大类热门资源免费畅读
续费一年阅读会员，立省24元！
汇总资料cho细胞蛋白表达系统
上传于||文档简介
&&个​人​总​结​,​C​H​O​细​胞​的​培​养​,​驯​化​,​筛​选​等​!
阅读已结束，如果下载本文需要使用2下载券
想免费下载本文？
下载文档到电脑，查找使用更方便
还剩4页未读，继续阅读
你可能喜欢 上传我的文档
 下载
 收藏
该文档贡献者很忙，什么也没留下。
 下载此文档
正在努力加载中...
CHO细胞表达系统
下载积分：30
内容提示：CHO细胞表达系统
文档格式：PDF|
浏览次数：142|
上传日期： 14:41:21|
文档星级：
该用户还上传了这些文档
CHO细胞表达系统
官方公共微信君，已阅读到文档的结尾了呢~~
全抗体在CHO细胞的高效表达表..
扫扫二维码，随身浏览文档
手机或平板扫扫即可继续访问
全抗体在CHO细胞的高效表达
举报该文档为侵权文档。
举报该文档含有违规或不良信息。
反馈该文档无法正常浏览。
举报该文档为重复文档。
推荐理由：
将文档分享至：
分享完整地址
文档地址：
粘贴到BBS或博客
flash地址：
支持嵌入FLASH地址的网站使用
html代码：
&embed src='/DocinViewer-4.swf' width='100%' height='600' type=application/x-shockwave-flash ALLOWFULLSCREEN='true' ALLOWSCRIPTACCESS='always'&&/embed&
450px*300px480px*400px650px*490px
支持嵌入HTML代码的网站使用
您的内容已经提交成功
您所提交的内容需要审核后才能发布，请您等待！
3秒自动关闭窗口注射用重组人促红素CHO细胞冻干 -
【通用名称】拼音名：ZhusheyongChongzuRenCuhongsu(CHOXibao)英文名：RecombinantHumanErythropoietinforInjection(CHOCell)书页号：2005年版三部－229本品系由含有高效表达人红细胞生成素(简称人促红素)基因的中国卵巢(CHO)细胞，经细胞培养、分离和高度纯化后冻干制成。含适宜稳定剂，不含防腐剂和抗生素。1基本要求生产和检定用设施、原料及辅料、水、器具、动物等应符合“凡例”的有关要求。2制造2.1工程细胞2.1.1名称及来源重组人促红素工程系由带有人促红素基因的重组质粒转染的CHO-dhfr-(二氢叶酸还原酶基因缺陷型细胞)细胞系。2.1.2细胞库建立、传代及保存由原始细胞库的细胞传代，扩增后冻存于液氮中，作为主细胞库；从主细胞库的细胞传代，扩增后冻存于液氮中，作为工作细胞库。每次传代不超过批准的代次。细胞系冻存于液氮中，检定合格后方可用于生产。2.1.3主细胞库及工作细胞库细胞的检定应符合“生物制品生产用动物细胞基质制备及检定规程”规定。2.1.3.1外源因子检查细菌和真菌、支原体、检查均应为阴性。2.1.3.2细胞鉴别试验应用同工酶分析、生物、免疫学、细胞学和遗传标记物等任一方法进行鉴别，应为典型CHO细胞。2.1.3.3人促红素表达量应不低于原始细胞库细胞表达量。2.2原液2.2.1细胞的复苏与扩增从工作细胞库来源的后，于含灭能小牛培养液中进行传代、扩增，供转瓶或细胞培养罐接种用。小牛血清的质量应符合规定(附录XIIID)。2.2.2细胞培养液生产用细胞培养液应不含牛血清和任何抗生素。2.2.3细胞培养细胞培养全过程应严格按照无菌操作。细胞培养时间可根据细胞生长情况而定。2.2.4分离纯化收集的培养液采用经批准的超滤法或其他适宜方法进行浓缩，多步色谱纯化后制得高纯度的重组人促红素，即为人促红素原液。除菌过滤后保存于适宜温度，并规定其有效期。2.2.5原液检定按3.1项进行。2.3半成品2.3.1配制与除菌原液加入适宜稳定剂，并用缓冲液稀释。除菌过滤后即为半成品。2.3.2半成品检定按3.2项进行。2.4成品2.4.1分批应符合“生物制品分批规程”规定。2.4.2分装及冻干应符合“生物制品分装和冻干规程”规定。半成品应及时分装、冷冻。冻干的全过程中，制品温度应不高于30℃。2.4.3规格应为经批准的规格。2.4.4包装应符合“生物制品包装规程”规定。3检定3.1原液检定3.1.1蛋白质含量依法测定(附录ⅥB第二法)。3.1.2生物学活性3.1.2.1体内法依法测定(附录ⅩB)。3.1.2.2体外法按酶联免疫法试剂盒说明书测定。3.1.3比活性每1mg蛋白质应不低于1.2×10〈5〉IU。3.1.4纯度3.1.4.1电泳法依法测定(附录ⅣC)。用非还原SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法，考马斯亮蓝染色，分离胶胶浓度为12.5%，加样量应不低于10μg，经扫描仪扫描，纯度应不低于98.0%。3.1.4.2高效液相色谱法依法测定(附录ⅢB)。亲水硅胶柱，排阻极限300kD，孔径24nm，粒度10μm，直径7.5mm，长30cm；流动相为3.2mmol/L磷酸氢二钠-1.5mmol/L磷酸二氢钾-400.4mmol/L氯化钠，pH7.3；上样量20～100μg，于波长280nm处检测，以人促红素色谱峰计算理论板数应不低于1500。按面积归一化法计算人促红素纯度，应不低于98.0%。3.1.5分子量依法测定(附录ⅣC)。用还原型SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法，考马斯亮蓝R250染色，分离胶胶浓度为12.5%，加样量应不低于1μg，分子质量应为36～45kD。3.1.6紫外光谱扫描依法测定(附录ⅡA)，最大吸收峰279nm±2nm；最小吸收峰250nm±2nm；在320～360nm处无吸收峰。3.1.7等电点依法测定(附录ⅣD)，使用pH值为3.0～5.0的两性电解质，等电点应为pH3.3～4.3。3.1.8唾液酸含量每1mol人促红素应不低于9.0mol(附录ⅥC)。3.1.9外源性残留量每10000IU人促红素应不高于100pg(附录ⅨB)。3.1.10CHO残留量用双抗体夹心酶联免疫法检测，应不高于0.10%。3.1.11内毒素检查每10000IU人促红素应小于2EU(附录ⅫE凝胶限量试验)。3.1.12牛血清白蛋白残留量用酶联免疫法检测，应不高于0.01%。3.1.13肽图(至少每半年测定1次)供试品经透析、冻干后，用1%碳酸氢铵溶液溶解并稀释至1.5mg/ml，依法测定(附录ⅧE)，其中加入胰蛋白酶(序列分析纯)，37℃±0.5℃保温6小时，色谱柱为反相C8柱(25cm×4.6mm，粒度5μm，孔径30nm)，柱温为45℃±0.5℃；流速为每分钟0.75ml；进样量为20μl；按下表进行梯度洗脱(表中A为0.1%三氟乙酸水溶液，B为0.1%三氟乙酸-80%乙腈水溶液）。3.1.14N-末端氨基酸序列(至少每年测定1次)用氨基酸序列分析仪测定。N-末端序列应为：Ala-Pro-Pro-Arg-Leu-Ile-Cys-Asp-Ser-Arg-Val-Leu-Glu-Arg-Tyr。3.2半成品检定3.2.1细菌内毒素检查每1000IU人促红素应小于2EU(附录ⅫE凝胶限量试验)。3.2.2无菌检查依法检查(附录ⅫA)，应符合规定。3.3成品检定除复溶时间和水分测定外，应按标示量加入灭菌注射用水，复溶后进行其余各项检定。3.3.1鉴别试验按免疫印迹法(附录ⅧA)或免疫斑点法(附录ⅧB)测定，应为阳性。3.3.2物理检查3.3.2.1外观应为白色疏松体，复溶后为无色澄明液体。3.3.2.2复溶时间加入标示量的灭菌注射用水，复溶时间应不超过2分钟。3.3.2.3可见异物依法检查(附录ⅤB)，应符合规定。3.3.2.4装量差异按附录ⅠA中装量差异项进行，应符合规定。3.3.3化学检定3.3.3.1水分应不高于3.0%(附录ⅦD)。3.3.3.2pH值应为6.4～7.4或5.4～6.4(附录ⅤA)。3.3.3.3钠离子含量应不大于190mmol/L(附录ⅦJ)。3.3.3.4枸橼酸离子含量应不大于25mmol/L(附录ⅦH第二法)。3.3.3.5蛋白质含量依法测定(附录ⅥB第二法)，应符合经批准的蛋白质含量范围。3.3.4生物学活性3.3.4.1体外法按酶联免疫法试剂盒说明书测定供试品体外活性(IU/m1)，根据标示装量计算供试品生物学活性(IU/瓶)，应为标示量的80%～120%。3.3.4.2体内法按附录ⅩB测定供试品体内活性(IU/ml)，根据标示装量计算供试品生物学活性(IU/瓶)，应为标示量的80%～140%。3.3.5无菌检查依法检查(附录ⅫA)，应符合规定。3.3.6细菌内毒素检查每1000IU人促红素应小于2EU(附录ⅫE凝胶限量试验)。3.3.7异常毒性检查依法检查(附录ⅫF小鼠试验法)，应符合规定。4保存、运输及有效期于8℃以下避光保存和运输。自分装之日起，按批准的有效期执行。5使用说明应符合“生物制品包装规程”规定。
为本词条添加和相关影像
互动百科的词条（含所附图片）系由网友上传，如果涉嫌侵权，请与客服联系，我们将按照法律之相关规定及时进行处理。未经许可，禁止商业网站等复制、抓取本站内容；合理使用者，请注明来源于。
登录后使用互动百科的服务，将会得到个性化的提示和帮助，还有机会和专业认证智愿者沟通。
您也可以使用以下网站账号登录：
此词条还可添加&
编辑次数：3次
参与编辑人数：2位
最近更新时间： 16:47:29
贡献光荣榜
扫描二维码用手机浏览词条
保存二维码可印刷到宣传品
扫描二维码用手机浏览词条
保存二维码可印刷到宣传品DG44-CHO细胞-学术百科-知网空间
DG44-CHO细胞
DG44-CHO细胞
与"DG44-CHO细胞"相关的文献前10条
目的:建立并验证DG44-CHO细胞快速、无血清培养体系的转染方法。方法:将绿色荧光蛋白表达质粒pEGFP-N1电转入DG44-CHO细胞,用流式细胞仪检测绿色荧光蛋白的表达量;
【目的】构建人白细胞介素32(IL-32)和IgG4 Fc段的融合基因真核表达载体IL-32-IgG4(Fc)-pOp-tiVEC,建立稳定转染的中华仓鼠卵巢细胞(CHO/DG4
本研究利用基因重组技术构建人IL35-IgG4(Fc)融合基因真核表达载体,稳定转染CHO/DG44细胞并检测重组蛋白的表达。主要采用聚合酶链式反应(PCR)从脂多糖(Lipop
目的　建立高效表达人肝细胞生长因子 (hHGF)的CHO细胞株。方法　将hHGF全长cDNA亚克隆到真核表达载体pTargetTM上 ,构建出pTargetTM-hHGF哺乳动物
目的研究CTLA-4/Ig融合蛋白在CHO真核表达系统中的表达,并纯化所表达的CTLA-4/Ig融合蛋白,为其功能研究和临床应用奠定基础。方法将线性化的pMM-CTLA-4-Ig
目的:构建针对补体激活物的特异靶向补体抑制物,并对其进行体外活性鉴定。方法:将补体受体(CR2)与补体抑制物(促衰变因子,DAF)以融合表达方式(顺反结构)克隆到表达载体PBM中
"DG44-CHO细胞"的相关词
快捷付款方式
订购知网充值卡
<font color="#0-819-9993
<font color="#0-
<font color="#0-